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ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | ASD大鼠雄烯二酮ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Rat Androstenedione, ASD Elisa Kit |
貨號 | FS-R64673 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
宮頸黏液蛋白相關蛋白抗體英文全稱fructokinase英文簡稱fructokinase檢測范圍4948nmol/L-40U/L
水蛭素抗體英文全稱11 β - hydroxysteroid dehydrogenase 1英文簡稱11β-HSD1檢測范圍4949nmol/L-16U/L
透明質酸及粘蛋白1抗體英文全稱16-αOHE-1英文簡稱16-αOHE-1檢測范圍4950nmol/L-320pg/mL
HEATR4蛋白抗體英文全稱20-HETE英文簡稱檢測范圍4951nmol/L-1600pg/mL
熱休克蛋白J1抗體英文全稱2 - hydroxy estradiol英文簡稱2-HE2檢測范圍4952nmol/L-100pg/mL
鐵調節蛋白/鐵調素抗體英文全稱6-keto-prostaglandin F1α英文簡稱6-keto-PGF1α檢測范圍4953nmol/L-1600pg/mL
熱休克蛋白90α抗體英文全稱8-oxoguanine DNA glycosydase英文簡稱OGG1檢測范圍4954nmol/L-400nmol/L
羥類固脫氫酶11β2抗體英文全稱C-opeptide of typeⅠcollagen英文簡稱CTX-Ⅰ檢測范圍4955nmol/L-8ng/mL
組織胺H3受體抗體英文全稱ICTP英文簡稱ICTP檢測范圍4956nmol/L-8ng/mL
磷酸化組蛋白H1抗體英文全稱apelin 12英文簡稱AP12檢測范圍4957nmol/L-8ng/mL
造血干細胞特異性蛋白抗體英文全稱apelin 36英文簡稱AP36檢測范圍4958nmol/L-8ng/mL
熱休克蛋白71抗體英文全稱ATP-binding cassette transporter A1英文簡稱ABCA1檢測范圍4959nmol/L-240pg/mL
微絲相關蛋白hHBrk1抗體英文全稱CCAAT;Enhancer Binding Protein Alpha英文簡稱C;EBPα檢測范圍4960nmol/L-8ng/mL
小鼠抗聚組氨酸單克隆抗體英文全稱CCAAT;Enhancer Binding Protein Beta英文簡稱C;EBPβ檢測范圍4961nmol/L-2000pg/mL
發狀分裂相關增強子-5抗體英文全稱Cyclic AMP response element binding protein英文簡稱CREB檢測范圍4962nmol/L-48ng/mL
組蛋白去乙?;?/font>5抗體英文全稱CC-chemokine receptor 5英文簡稱CCR-5檢測范圍4963nmol/L-8ng/mL
人癌因蛋白質p190/bcr-abl ELISA試劑盒NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
人網膜素(omentin)ELISA試劑盒NCBP1/CBP80 (D7Z2Z) Rabbit mAb100 ul
人八聚體轉錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 SirT1 (C14H4) Rabbit mAb20 ul
人八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 SirT1 (C14H4) Rabbit mAb100 ul
人核質蛋白22(NMP-22)ELISA試劑盒LRRC8A/SWELL1 Antibody100 ul
人B細胞κ 輕肽因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA試劑盒 FoxO3a (75D8) Rabbit mAb100 ul
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒eIF4G Antibody100 ul
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒FoxO4 (55D4) Rabbit mAb100 ul
ASD大鼠雄烯二酮ELISA試劑盒實驗原理人結締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Geobacillus toebii
鼠結締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit,48T/96T 規格: 0.5ml
大鼠結締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Mucor heterogamus var. moelleri
人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人β素(BTC) ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus awamori
鼠β素(BTC)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus versicolor var. versicolor
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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