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| 貨號 | FS-X9583 |
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中文名稱：羅丹明123染色試劑盒
英文名稱：Cell Apoptosis Detection Kit(Rhodamine 123)
產品規格：100T
貨號：FS-X9583
產品介紹:
本試劑盒適用于培養的細胞或從組織中提取出的線粒體的膜電位檢測。羅丹明123（Rhodamine 123）是一種可透過細胞膜的陽離子熒光染料，是一種線粒體跨膜電位的指示劑。它可以快速通過細胞膜，僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲，并且對細胞沒有任何毒性。其大激發波長為507nm，大發射波長為529nm。在熒光顯微鏡下觀察，呈現黃綠色熒光，也可用熒光光度計或流式細胞儀檢測，通過熒光信號的強弱來檢測線粒體膜電位的變化和凋亡的發生。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
組織蛋白meiG自身抗體(Cath G Ab)elisa檢測試劑盒 英文名稱：Cath G Ab ELISA Kit，Cath G Ab，
周期su依賴性激mei7(CDK-7)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CDK-7 ELISA Kit，CDK-7，
中性粒細胞性磷suanmei(NAP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NAP ELISA Kit，NAP，
著絲粒蛋白B(CENP-B)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CENP-B ELISA Kit，CENP-B，
游離脂肪suan(FFA)elisa檢測試劑盒 英文名稱：FFA ELISA Kit，FFA，
異鎖鏈su(IDES)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IDES ELISA Kit，IDES，
胰島su受體底物1(IRS1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：IRS1 ELISA Kit，IRS1，
UDP半乳糖-4-差向異構mei(GALE)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GALE ELISA Kit，GALE，
Sideroflexin2蛋白(SFXN2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SFXN2 ELISA Kit，SFXN2，
TATA盒結合蛋白(TBP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：TBP ELISA Kit，TBP，
RNA結合基元蛋白20(RBM20)elisa檢測試劑盒 英文名稱：RBM20 ELISA Kit，RBM20，
Podocin蛋白(PDCN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PDCN ELISA Kit，PDCN，
N-乙酰β-D-氨基葡萄糖mei(NAGase)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NAGase ELISA Kit，NAGase，
Neuroguidin蛋白(NGDN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NGDN ELISA Kit，NGDN，
Megane蛋白(Mgn)elisa檢測試劑盒 英文名稱：Mgn ELISA Kit，Mgn，
Janus激mei2(JAK2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：JAK2 ELISA Kit，JAK2，
GTP環化水解mei1(GCH1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GCH1 ELISA Kit，GCH1，
羅丹明123染色試劑盒鹽suan地美環su標準品 規格:200mg 英文名稱：
鹽suan金霉su標準品 規格:200mg 英文名稱：
芝麻油相關物質B標準品 規格:6mg×3vials 英文名稱：
呋辛酯標準品 規格:350mg 英文名稱：Cefuroxime Axetil
鹽suan心得平標準品 規格:200mg 英文名稱：Oxprenolol Hydrochloride
異麥芽tong糖chun標準品 規格:200mg 英文名稱：Isomalt
六jia密an標準品 規格:500mg 英文名稱：Altretamine
托美丁鈉標準品 規格:500mg 英文名稱：Tolmetin Sodium
噻肟鈉標準品 規格:350mg 英文名稱：Cefotaxime Sodium
鹽suan替扎尼定標準品 規格:200mg 英文名稱：Tizanidine Hydrochloride
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