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巴氏染色液(EA36)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:42:50瀏覽次數:171次

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貨號 FS-X9912
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Mcl1 髓樣白血病-1

產品介紹:

用途:

細胞學樣本常規染色,尤其適用于婦科細胞學涂片染色、細胞脫落標本染色。

注意事項:

巴氏染色液是用蘇木素、橙黃、磷鎢酸、亮綠等配制而成,用于處理分泌物等細胞脫落標本,細胞核呈藍色或黑色,角化鱗狀細胞胞漿呈粉紅或橘紅色。

儲存條件:室溫,12個月

中文名稱:巴氏染色液(EA36)

英文名稱:Papanicolaou EA36

產品規格:4×100ml|4×250ml|4×500ml

貨號:FS-X9912

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

半裸法氏殼肝結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺抗體Human HPCAL4 小鼠基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒

香菇核突觸蛋白抗體Human HPDL 小鼠基質金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內參抗體)Human HPD 小鼠基質金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體Human HPGD 小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒

球孢白僵菌β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體Human HPS1 小鼠基質金屬蛋白2/明膠A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒

冷湖黃桿菌β淀粉樣肽1-28/β-Amyloid 1-28抗體Human HPGDS 小鼠基質金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒

金針菇激活受體2A抗體Human HPS3 小鼠基質金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒

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高加索異常倚囊霉β淀粉樣肽(1-42)抗體Human HOXC4 小鼠肌激同工MM(CK-MM)免疫試劑盒

外來毛霉橙色變種載脂蛋白A1抗體Human HOXC8 小鼠肌激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒

累四菲鏈霉菌β-抑制蛋白1抗體Human HOXD11 小鼠肌激(CK)免疫試劑盒

鞘桿菌屬錨定蛋白B抗體Human HOXD12 小鼠肌球蛋白重鏈(MHC)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌銅轉運蛋白質α鏈抗體Human HOMEZ 小鼠肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒

谷棒桿菌單克/抗體Human HOOK3 小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒

黃灰鏈霉菌ASMTL蛋白抗體Human HOXD13 小鼠肌酐(Cr)免疫試劑盒

銅綠假單孢菌Pseudomonas│aeruginose 質量規格:>99%,BR白介11試劑盒山羊豆堿

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BR白介10試劑盒藤子

黑曲霉Aspergillus│niger 質量規格:>99.9%,AR白喉抗體試劑盒四氫黃連堿
巴氏染色液(EA36)草鏈霉 2,3-二氨基順二狀瘤病IgM抗體

日本曲霉 水楊芐酯激肽釋放9

短乳桿 1,3-二-5,5-二甲基海因α-內啡肽

大腸埃希氏 靛紅酐逆轉錄病

麥氏游動微 4-代鄰苯二甲酐色P450家族成員2C19

*蜜粘褶=革裥 2-氨基噻唑-4-甲甲酯抗肽

黑曲霉 1-氨基-4-溴蒽醌-2-磺生長調節致癌基因β

泡盛曲霉 2,4,5-三氟-3-羥基生長調節致癌基因α;黑瘤生激因子

核側耳 乙氧甲叉乙乙酯凝集蛋白家族10

真姬菇 磷三(2-乙基)酯泛羧基末端水解42

三葉草根瘤 2,6-二甲基代乙酰苯補體成分C1q受體

側孢短芽孢桿 (R)-(+)-2-(4-羥基苯氧基)癲癇發作6樣蛋白

短芽孢桿 4-基甲酯卵泡抑相關蛋白

雙孢蘑菇 3,4-二氟肉桂S100鈣結合蛋白A12;鈣粒蛋白C

枯草芽孢桿 羥基-B-環糊精蛋白體亞基β5型

 


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