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| 貨號 | FS-X9873 |
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中文名稱：細胞膜染色試劑CM-Dil
英文名稱：
產品規格：200μl
貨號：FS-X9873
產品介紹:
細胞膜熒光染料CM-DiI 是一種新型細胞膜染料，通過與膜結構的脂質分子結合而標記細胞，適合監測細胞運動以及細胞定位分析。因具有良好的染料維持性，可用以追蹤多次傳代細胞的運動特性。其有著強而穩定的紅色熒光(Ex/Em=553/570nm)，與綠色熒光染料以及蛋白具有良好的熒光分辨性，適合做多重指標染色。 CM-Dil水溶性較好，便于懸浮細胞和固定細胞染色溶液的制備；工作濃度下，此染料無細胞毒性，不會影響細胞活力以及增殖能力。一些細胞經CM-Dil染色后，可在后續的固定，透化和石蠟包埋處理中維持穩定的標記，因此特別適用于同時做細胞膜標記以及后續的免疫組化，熒光原位雜交或者電鏡觀察的實驗。 研究證實，CM-DiI標記后熒光在胞內表達穩定，陽性標記率達98%以上，標記細胞形態良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導分化情況；或將標記的細胞注入體內，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。 CM-DiI標記細胞呈紅色熒光，熒光波長：λex=553 nm,λem=570 nm。 儲存條件：-20避光保存。 有效期：一年。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
空腸彎曲桿菌脂聯受體2抗體Human LSM8 豬去乙酰化饑餓激(dGHRL)免疫試劑盒
釀酒酵母ANGEL1蛋白抗體Human LSP1 豬去甲腎上腺(NE)免疫試劑盒
高粱生平臍蠕孢ANGEL2蛋白抗體Human LSR 豬趨化因子配體28(CCL28)免疫試劑盒
糞腸球菌ANKLE2蛋白抗體Human LTBP1(Latent-transforming growth factor beta-binding protein 1) 豬(HYD)免疫試劑盒
彩色豆馬勃特異性錨樣蛋白1抗體Human LUC7L 豬前列腺G/H合2(PTGS2)免疫試劑盒
黑曲霉錨蛋白重復結構域蛋白13B抗體Human LUC7L2 豬前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體Human LY6D 豬前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
白色鏈孢囊菌錨蛋白重復結構域蛋白20A3抗體Human LUZP1 豬葡萄糖轉運蛋白2(GLUT2)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌錨蛋白重復結構域蛋白22抗體Human LXN 豬皮質抑/皮質穩定蛋白(CORT)免疫試劑盒
核盤菌（正確）錨蛋白重復結構域蛋白50抗體Human LSM10 豬皮質(CORT)免疫試劑盒
假腸膜明串珠菌氫離子轉運ATP合成6G抗體Human LY6E 豬皮質類固結合球蛋白(SERPINA6)免疫試劑盒
瓶孢青霉錨蛋白重復結構域蛋白26抗體Human LSM11 豬皮質(Cortisol)免疫試劑盒
勞地毛霉錨蛋白重復結構域蛋白26抗體Human LY6G5B 豬XIIIB鏈(F13B)免疫試劑盒
釀酒酵母型肝炎病核結合蛋白-1抗體Human LSM14A 豬XIIIA鏈(F13A1)免疫試劑盒
糙孢藍狀菌芳香基硫酯K抗體Human LRRC4C 豬X(F10)免疫試劑盒
粉紅粘帚霉神經元突觸前膜蛋白抗體Human LRRC8C 豬ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒
乳桿菌屬Lactobacillus│sp. 質量規格：>98%,BR補體片斷5b試劑盒左旋千金藤啶堿
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格：>99%,BR補體片斷5a試劑盒紫蘇
竹喙球菌Ceratosphaeria│phyllostachydis Zhang 質量規格：活：20萬u/g補體片斷4b試劑盒竹紅菌乙
細胞膜染色試劑CM-Dil*灰葡萄孢 2,3,5,6-四溴對二甲苯BK病IgMkan抗體
假單胞 異丁香葉酯磷酯Cε鏈1
釀酒酵母 異丁橙花酯CD2關聯蛋白
龜裂鏈霉 2-氟烯甲酯轉化受體電位陽離子通道亞家族C成員6
金黃桿屬 5--2-三氟甲苯褐黑
產氨棒桿 5--2-甲苯γ谷氨酰轉移2
堀越氏芽孢桿 4-三氟乙優黑
產朊假絲酵母 檸檬鐵 水合物雌酮1
薄層桿 3-溴-5-吡啶Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激1
產氨棒桿 反式-4-乙酰氨基環己Rho關聯含卷曲螺旋蛋白激2
狂犬病病 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine總巰基
少根根霉 (R)-1,2,3,4-四氫-1-萘色
粉狀畢翅酵母 3-吡啶甲脒蛋白聚糖
葡枝根霉 6-羥基吲唑雌受體β
豌豆根瘤 2,5-二溴吡總表皮生長因子受體
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