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巴氏染色液(EA50)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:42:06瀏覽次數:174次

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貨號 FS-X9910
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中文名稱:巴氏染色液(EA50)

英文名稱:Papanicolaou EA50

產品規格:4×100ml|4×250ml|4×500ml

貨號:FS-X9910

產品介紹:

用途:

細胞學樣本常規染色,尤其適用于婦科細胞學涂片染色、細胞脫落標本染色。

注意事項:

巴氏染色液是用蘇木素、橙黃、磷鎢酸等配制而成,用于處理分泌物等細胞脫落標本,細胞核呈藍色或黑色,角化鱗狀細胞胞漿呈粉紅或橘紅色。

儲存條件:室溫,12個月

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

*美味牛肝菌肌側索硬化癥相關蛋白1抗體Human HSPB2 小鼠結蛋白(Des)免疫試劑盒

香菇β淀粉樣前體蛋白結合蛋白2抗體(X11β)Human HuR 小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)免疫試劑盒

魯氏毛霉乙酰結合蛋白抗體Human HSPB8 小鼠角化生長因子(KGF/FGF-7)免疫試劑盒

糾纏青霉磷化分裂周期蛋白16抗體Human HSPB7 小鼠角化內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)免疫試劑盒

腐皮鐮孢白血病相關蛋白AHI1抗體Human HSN2 小鼠膠質系來源的神經營養因子(GDNF)免疫試劑盒

阿舒多囊霉活化誘導胞嘧啶核脫抗體Human HURP 小鼠膠原I(Collagenase I)免疫試劑盒

淡紫紫霉三磷腺結合盒轉運蛋白9抗體Human HUS1 小鼠膠原吡啶交聯(PYD)免疫試劑盒

玫紅假裸囊菌ADP核糖基化因子3抗體Human HSPA13 小鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒

乳酒假絲酵母含酰tRNA合成結構域1抗體Human HSP20 小鼠降鈣基因相關肽(CGRP)免疫試劑盒

山岡單胞菌粘附分子IgG樣結構域蛋白1抗體Human HUS1B 小鼠降鈣(CT)免疫試劑盒

哈茨木霉卡爾曼綜合癥基因1抗體Human HSPB2 小鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒

根瘤菌含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體Human HSPA1L 小鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒

尖孢含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體Human HSPB7 小鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒

含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體Human HUS1B 小鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒

淡黃木層孔菌鈉ATP通道蛋白抗體Human HSPA1L 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒

雞縱菌AGXT2L2蛋白抗體Human HSPB2 小鼠甲狀腺過氧化物(TPO)免疫試劑盒

: Ye1110資源名稱: 小腸結腸炎耶爾森氏菌 質量規格:比活度:>1.2 U/mg,BC白介15試劑盒棗仁皂B1

芽孢八疊球菌(加詞待譯)Sporosarcina│globispora 質量規格:>98%,BR白介13試劑盒3,4,5-三咖啡酰奎寧

擬盤多毛孢Pestalotiopsis│sp. 質量規格:>99%,BR白介12受體亞基β-1試劑盒黃皮
巴氏染色液(EA50)乳乳球 3,4-二氟苯磺酰酮還原1C3

叢梗孢屬 3-甲基-2-人類嗜TⅠ型病抗體

燼灰吸水鏈霉 鹽阿莫洛芬吻

紫棕炭團 苯Mdm2 p53結合蛋白同源物

弗氏鏈霉 2-萘-6-磺酰磺基轉移 1A2

地衣芽孢桿 2-溴-2',4'-二氟苯乙酮狀瘤病抗原

劣質食用油鑒別速測包 N,N-二甲基癸胰島自身抗體

肉梭 A型* 4,4'-二苯乙烯二羧N-甲基-D-天冬受體抗體

WAL 14507 [DSM 19850] 表沒食子兒茶沒食子酯蛋白激活受體2

假灰鏈霉 鄰苯二甲二(2-丁氧基乙基)酯仙臺病

嗜糖黃桿 2,6-二甲基-4-庚弗林蛋白

雙重輪絲鏈霉 2-氨基蒽醌載脂蛋白A1抗體

頂青霉 烯酰氧乙基基化內皮型一氧化氮合

Nesterenkonia flava 4-溴巴豆甲酯磷化內皮型一氧化氮合

釀酒酵母 月桂磷化內皮型一氧化氮合

 


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