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貨號	FS-X10108

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)

英文名稱：

產品規格：2×20ml|2×50ml

貨號：FS-X10108

產品介紹:

用途：

又稱芽胞染色液，觀察菌體芽孢結構

注意事項：

染色后菌體為紅色，芽孢為綠色。

儲存條件：室溫，避光，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

紡織品 4-基偶氮磷化真核延伸因子激2抗體Human IVL(Involucrin) 人ICOS配體(ICOSLG)免疫試劑盒

冬青節桿菌纖連蛋白4抗體Human NCEH1 (Neutral cholesterol ester hydrolase 1) 人ICE蛋白激活因子(IRAP)免疫試劑盒

葡萄座腔菌延伸因子結合蛋白EFTUD2抗體Human NINJ1 (Ninjurin-1) 人I 型膠原蛋白(COL I)免疫試劑盒

弗吉尼亞鏈霉菌表皮生長因子樣蛋白6抗體Human NPTXR(Neuronal pentraxin receptor) 人H-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白(H-Cad/CDH13)免疫試劑盒

谷棒桿菌磷/磷二酯家族成員6抗體Human NPFF (Pro-FMRFamide-related neuropeptide FF) 人HSP60 IgM抗體免疫試劑盒

鹽漬芽孢桿菌屬核轉運蛋白ENT1抗體Human MAP2(Microtubule-associated protein 2) 人HSP60 IgG抗體免疫試劑盒

假單胞菌核轉運蛋白ENT2抗體Human NPSR1 (Neuropeptide S receptor) 人HSP60 IgA抗體免疫試劑盒

小孢矛束霉鳥核交換因子4Human NLK (Serine/threonine-protein kinase NLK) 人H-ras 免疫試劑盒

曲霉磷化紅膜條帶4.1蛋白抗體Human NETO1 (Neuropilin and tolloid-like protein 1) 人HLAⅡ類組織相容性抗原，DPα1鏈(HLA-DPA1)ELSIA 試劑盒

霍氏腸桿菌磷化酪蛋白激受體B1抗體Human GAP43(Neuromodulin) 人HIV-1 TAT互動蛋白2(HTATIP2/TIP30)免疫試劑盒

堀越氏芽孢桿菌蛋白激受體B1+B2抗體Human NSF (Vesicle-fusing ATPase) 人HIV(1+2)抗原抗體免疫試劑盒

白色念珠菌磷化神經鳥置換因子Ephexin1抗體Human Nitric oxide synthase-interacting protein 人H5型病(H5N1)抗體(IgG)免疫試劑盒

Marisediminicola磷化Ephrin B抗體Human AIRE(Autoimmune regulator) 人G蛋白偶聯受體152(GPR152/PGR5)免疫試劑盒

山茶惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體Human NMI (N-myc-interactor) 人G蛋白偶聯受體109A(GPR109A)免疫試劑盒

黑曲霉磷化紅生成受體抗體Human NRP2 (Neuropilin-2) 人G蛋白偶聯膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒

岸海桿狀菌磷化HER2受體抗體Human NHEJ1 (Non-homologous end-joining factor 1) 人G蛋白偶聯雌激受體1(GPR30)免疫試劑盒

類球紅細菌Rhodobacter│sphaeroides 質量規格：分析標準品,>99.5%

雞傷門氏菌Salmonella│gallinarum 質量規格：分析標準品，99.3%槐角

葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 質量規格：100μg/ml,u=5%
芽孢染色液(Scharffer-Fulton法)枯草芽孢桿 5-乙基-3-羥基-4-甲基-2(5H)-呋喃酮色P450

副球屬 2-溴-N,N-二硫化氫

大腸埃希氏桿 2,6-二氟芐基半胱脫巰基

慢生根瘤甲基烯甲氧基乙酯乙脫氫

杏鮑菇(13 ) 1-乙酰基-2,3,5-三苯甲酰氧基-1-beta-D-呋喃核糖纖維合成

大豆慢生根瘤 1-甲基-2-吡咯羧類胡蘿卜

芽孢桿屬 2--4-(三氟甲氧基)苯藻紅蛋白

芽胞桿八乙烯基-POSS藻藍蛋白

Boc-L-脯氨蘋果

蘇云金芽孢桿鲇澤亞種 7-硝基-2-羧雙A

焦曲霉 7-硝基α-淀粉

玫瑰皮黃鏈霉二苯亞甲基甘乙酯脫落合成

樟疫霉 5-芐氧基-3-甲生長合成

貝萊斯芽胞桿位己內酯磷脂D

大腸埃希氏苯并環（BCB）長鏈脂肪
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)