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貨號 | FS-X9905 |
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產品介紹:
用途: 用于外周血細胞的活體染色,也可以用于其它活體細胞或組織的染色。 注意事項: 細胞核染成紅色,細胞核中的核酸呈酸性,因此細胞核會被染成紅色。由于溶酶體(lysome)中也是酸性環境,因此溶酶體也是可以被中性紅染色液染成紅色的。 儲存條件:室溫,12個月 |
中文名稱:中性紅染色液(活細胞專用)
英文名稱:
產品規格:100ml
貨號:FS-X9905
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
北京棒桿菌磷化自噬相關蛋白4D抗體Human IRF6(Interferon regulatory factor 6) 小鼠粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒
洋蔥假單胞菌磷化自噬相關蛋白4C抗體Human INPP5A 小鼠酪羥化(TH)免疫試劑盒
糞銹傘磷化自噬相關蛋白7抗體Human INPP5B 小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)免疫試劑盒
印度拜葉林克氏菌磷化自噬相關蛋白16A抗體Human INPP5E 小鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化自噬相關蛋白9A抗體Human INPP5J 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)免疫試劑盒
毛榛畢赤酵母磷化自噬相關蛋白4D抗體Human INPP5K 小鼠可溶性血小板內皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
戊糖乳桿菌磷化自噬相關蛋白4D抗體Human Importin beta 小鼠可溶性血栓調節蛋白(sTM)免疫試劑盒
7#---2號(網紋馬勃)磷化腫瘤血管內皮標志物8抗體Human INTS4 小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
木霉磷化自噬相關蛋白4A抗體Human INTS12 小鼠可溶性髓系觸發受體-1(sTREM-1)免疫試劑盒
溶桿菌磷化自噬相關蛋白4C抗體Human INTS7 小鼠可溶性瘦受體(sLR)免疫試劑盒
白金針菇—2號磷化自噬相關蛋白16A抗體Human INTS5 小鼠可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)免疫試劑盒
楊爛皮殼蕉孢菌磷化蛋白激AKT3抗體Human INTS9 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)免疫試劑盒
香菇磷化腎上腺能受體β2抗體Human INPP5J 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)免疫試劑盒
間座殼磷化水通道蛋白2抗體Human ING5 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)免疫試劑盒
丁香假單胞菌磷化自噬相關蛋白3抗體Human INMT 小鼠可溶性補體激活產物SC5b9 免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母縮2抗體Human INO80 小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)免疫試劑盒
: T.666242資源名稱: 傷門氏菌 質量規格:>98%,BR白介1受體拮抗劑試劑盒11-羰基-Β-乙酰乳香
柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei 質量規格:>90%,BS白介1可溶性受體Ⅱ試劑盒拓撲替康
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98%,BR白介1可溶性受體Ⅰ試劑盒檀香
中性紅染色液(活細胞專用)黃色短桿 2-氟-5-羥流感病IgM抗體
中慢生華癸根瘤 (R)-(-)-2-芐-1-苯乙副流感病IgG抗體
孟氏假單胞 O-磷乙呼吸道合胞病IgG抗體
大腸埃希 2-羥基吡啶-5-呼吸道合胞病IgM抗體
產氣莢膜梭 C型 1,5-己二烯-3,4-二程序性死亡-1
單形擬桿 2,4-二-5-氟-3-甲(易)葡萄糖-6-磷脫氨2
長赤細 丁香葉酯孕受體
靈芝(紅芝, 赤芝) N-乙基-1,3-二纖維蛋白原蛋白1
輪枝孢 2-甲氧基-4-吡啶甲賈地鞭毛蟲抗原
嗜根寡養單胞 1,3-二乙基-2-硫脲ASPM
多節孢屬 炔草血清白蛋白
好食脈孢 2-溴-5-甲氧基吡啶蛋白激Bβ
釀酒酵母 5,5,5-三氟-4-羥基-4-(三氟甲基)-2-戊酮
黃疣倫茨氏 四吡啶甲β-骨膠原交聯
植物乳桿 甲芐酯腺環化4
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