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細胞質(zhì)染色試劑盒-C01

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產(chǎn)品型號

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廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:19:23瀏覽次數(shù):165次

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貨號 FS-X9866
細胞質(zhì)染色試劑盒-C01正在熱銷的產(chǎn)品:IL-11 白介11抗體硫氧鈦 synthesis grade
IL-10RA 白介-10受體a抗體硫氧鈦 93%
IL-10RB 白介-10受體β抗體2-溴-3-羥吡啶 98%
IL-12 (rat, mouse) 白介12抗體 (大鼠,小鼠)2--3-羥吡啶 98%
IL-12 (human) 白介12抗體(人)溴化鋰溶液 55 wt. %

產(chǎn)品介紹:

C01細胞質(zhì)染色試劑盒是利用C 系列探針進行細胞質(zhì)染色的試劑盒。本試劑盒中的C01細胞質(zhì)染色探針為綠色熒光標(biāo)記的細胞質(zhì)探針,具有490/515nm的大激發(fā)/發(fā)射波長。

C系列探針是對活細胞的細胞質(zhì)進行選擇性染色的一類熒光染料,該系列探針可以選擇性標(biāo)記細胞質(zhì),只需要納摩爾級(nM)濃度即可有效標(biāo)記活細胞。

C系列探針可自由穿過細胞膜,適用于觀察細胞質(zhì)內(nèi)部生物合成及相關(guān)發(fā)病機理。

C系列細胞質(zhì)探針具有多種顏色可以選擇,可根據(jù)情況對樣品進行多色標(biāo)記實驗。除了本試劑盒的綠色熒光探針,還可以提供紅色、藍色、橙色等顏色的染色試劑盒。

C01細胞質(zhì)綠色熒光探針有強的疏水性,能夠輕易穿透活細胞膜,進入細胞后,被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成膜非滲透性的極性分子CF,從而被滯留在細胞內(nèi),使胞質(zhì)發(fā)出強綠色熒光。CA 大激發(fā)波長490nm,大發(fā)射波長520nm。實際檢測時推薦使用的激發(fā)波長為488nm 左右,發(fā)射波長為 510~530nm。可以使用流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡檢測細胞。

除了針對細胞質(zhì)的C 系列熒光染色產(chǎn)品,還可以為您各種N 系列、M 系列、E 系列、G 系列和L 系列細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細胞亞結(jié)構(gòu)熒光染色試劑盒,以及鈣離子、鈉離子、神經(jīng)細胞等各種熒光染色試劑盒產(chǎn)品。

儲存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。

有效期:六個月。

中文名稱:細胞質(zhì)染色試劑盒-C01

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:500T

貨號:FS-X9866

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

美拉唑磺酰化物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Glipizide癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體包裝500ml

美拉唑鎂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Donepezil HCl趨化樣因子受體1抗體包裝1g

美拉唑鈉一合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Estrone造血干抗原CD133抗體包裝1g

沙坦酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: EstroneG蛋白偶聯(lián)受體相互作用蛋白1抗體(補體Clq TNF相關(guān)蛋白1)包裝250mg

沙拉秦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clindamycin HCl心肌營養(yǎng)1抗體包裝5g

沙利鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clindamycin HClC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體包裝5g

沙普秦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Verapamil HCl陽離子通道相關(guān)蛋白β亞基抗體包裝1g

硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Verapamil HCl特異性蛋白57抗體包裝250mg

扎格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mycophenolic acidL選擇抗體包裝1g

扎格雷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Mycophenolic acidCD53抗體包裝25g

巴卡丁 III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Amoxicillin 死亡同源蛋白6抗體包裝5g

柳氮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Amoxicillin 離子通道KB抗體包裝25g

巴龍霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: FenofibrateC型凝集結(jié)構(gòu)域家族12成員A抗體包裝5g

巴芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fenofibrate離子通道蛋白2抗體包裝1g

巴芬雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: ProbenecidC型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體包裝25mg

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:≥630µg/mg,BR,可用于培養(yǎng)血管內(nèi)皮生長因子試劑盒新芒果;neomangiferin

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR血管內(nèi)皮生長因子受體1試劑盒香紫蘇內(nèi)酯;clareolide

17507=AS1.3432=JCM12465=T3-B9資源名稱: 太湖新鞘菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品血管內(nèi)皮生長因子121試劑盒香草;Vanillic acid
細胞質(zhì)染色試劑盒-C01黑曲霉 蛙皮精

擬盤多毛孢屬 5-溴苊流行性出血熱

紅菇 順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯甲酯甘膽抗體

Pseudomonas guariconensis  2,4-二甲氧基苯硫氧還蛋白還原

糙皮側(cè)耳 -反式-1,2-環(huán)己二乙脫氫7

產(chǎn)紅青霉 正辛基 α-D-葡萄糖C多肽

聚生殼 3-硝基對酚核糖體S6激

豹斑鵝膏 4-O-(β-吡喃半乳糖)-D-吡喃甘露糖曲霉

釀酒酵母 3-甲氧基苯乙組三聚體核結(jié)合蛋白2

堅強芽孢桿 α-槐糖 單水合物總1型膠原氨基端延長肽

臭紅菇 L-3-苯乳羥甲基戊二酰合

水稻黃單胞(水稻白葉枯)* 2-溴-4-氟-1-苯,高遷移率族蛋白

康寧木霉 氨基六甘單甲醌氧化還原1

玫瑰考克氏 Bradykinin Fragment 2-9巨病IgA抗體

成團泛 亞磺鈉蛋白質(zhì)羧基

 


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