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| 貨號 | FS-01S63589 |
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產品名稱：SAI可溶性酸性轉化酶檢測試劑盒微量法
規格：100管/48樣
檢測方法：微量法
貨號：FS-01S63589
商品介紹：
測定意義 蔗糖轉化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據最適 pH，Ivr分為酸性轉化酶（AI）和中性轉化酶（NI）兩種類型。 AI的最適pH為3～5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細胞壁不溶性AI（B-AI）兩種類型。S-AI主要存在于細胞液泡或自由空間中，最適 pH 為4.5~5.0（酸性），通過降解液泡中蔗糖，調節液泡中蔗糖的利用和果實內糖類的積累。 測定原理： S-AI催化蔗糖降解產生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內510nm光吸收增加速率與S-AI活性成正比。 自備用品： 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細胞或組織樣品的制備： 培養細胞：先收集細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細胞數量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），超聲波破碎細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。 2、血清（漿）樣品：直接檢測。 |
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。 4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。 7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進行檢測。 |
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指甲髕骨綜合征相關蛋白NPS1抗體Human PFDN5 ELISA Kit對二甲醛
自噬微管相關蛋白輕鏈β3抗體Human PES1 ELISA Kit偏磷鈉
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