當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96THGF人肝細胞生長因子ELISA試劑盒實驗原理
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產品名稱 | HGF人肝細胞生長因子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human hepatocyte growth factor, HGF Elisa Kit |
貨號 | FS-H63287 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Hyphomonasrosenbergii HyphomonasrosenbergiiHyphomonasrosenbergii分離基物:海熱排氣,瓜伊馬斯流域,墨西哥灣安全等級:1模式菌株:102生長條件:26℃ 純度:98%
Ohtaekwangiakoreensis OhtaekwangiakoreensisOhtaekwangiakoreensis分離基物:沙灘,韓國安全等級:1模式菌株:108生長條件:30℃ 純度:98%
Fusobacriumnecrophorumsubsp.necrophorum 壞死梭桿菌壞死亞種Fusobacriumnecrophorumsubsp.necrophorum安全等級:1模式菌株:35、122.厭氧生長條件:37℃ 純度:98%
Corynebacriumglutamicum=Brevibacriumflavum 谷氨棒狀桿菌(黃色短桿菌)Corynebacriumglutamicum=Brevibacriumflavum分離基物:從ATCC14067衍生安全等級:1模式菌株:noL-精氨2生長條件:30℃ 純度:98%
Vibriocholerae 霍亂弧菌Vibriocholerae安全等級:1模式菌株:no129生長條件:37℃ 純度:98%
Burkholderia cepacia 洋蔥伯克霍爾德氏菌Burkholderia cepacia凍干安全等級:1模式菌株:,抗菌防腐劑的含量測定,培養基:測試,產洋蔥伯克菌素,質量控制菌株營養肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:97%
Raoulla rrigena=Klebsiella rrigena 土生拉烏爾菌(土生克雷伯菌)Raoulla rrigena=Klebsiella rrigena分離基物:活性污泥凍干安全等級:1模式菌株:no降低三聚胺121生長條件:26℃ 純度:97%
Pseudomonascitronellolis 香茅醇假單胞菌Pseudomonascitronellolis分離基物:除草劑泄漏的土壤,美國安全等級:1模式菌株:no104、109、121生長條件:28℃ 純度:98%
HGF人肝細胞生長因子ELISA試劑盒實驗原理Salmonella agar acc.to ONOZ 沙門氏菌瓊脂人晶狀體上皮cDNA二芐基二硫Anti-CSP (circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii) 環子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗原
Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT 沙門氏菌富集肉湯人虹膜色素上皮cDNA二芐基二硫Calcitonin 降鈣素抗原
Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT-VASSILIADIS( RVS)人結膜成纖維cDNAN,N'-二苯基乙二胺CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結合蛋白1抗原
沙門氏菌富集肉湯人無色素睫狀上皮 cDNAN,N'-二苯基乙二胺CTLA-4/CD152 淋巴相關抗原4/性T抗原-4
Salmosyst broth base Salmosyst 肉湯基礎人梁網cDNA托伐普坦CTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白
Salmosyst selective supplement tablets Salmosyst選擇添加片人羊膜上皮cDNA5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯Cx32(Connexin-32) 間隙連接蛋白32抗原
Selective agar for pathogenic fungi致病真菌選擇瓊脂人滋養層絨毛cDNA5-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯CX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原
Selenite cystine enrichment btoth for microbiology人絨毛間葉成纖維cDNA6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞胺酯Cx40 (Connexin-40) 間隙連接蛋白40(多肽)
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