產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：小鼠乳腺癌細胞    

產(chǎn)品英文：4T1

貨號：FS-01X9642

細胞培養(yǎng)條件： 1640+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫   
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒Human gastrin receptor，GsaR ELISA Kit

人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒Human cholecystokinin octapeptide，CCK-8 ELISA Kit

人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒Human α1-Acid glycoprotein，α1-AGP ELISA Kit

人丙二醛(MDA)ELISA試劑盒Human malondialchehyche，MDA ELISA Kit

人膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA試劑盒Human cholecystokinin，CCK ELISA Kit

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide，PⅢNP ELISA Kit

人Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒Human Collagen Type Ⅱ，Col Ⅱ ELISA Kit

人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒Human Collagen Type Ⅰ，Col Ⅰ ELISA Kit

人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒Human procollagen Ⅲ N-terminal peptide，PⅢNT ELISA Kit

人透明質酸(HA)ELISA試劑盒Human Hyaluronic acid，HA ELISA Kit

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒Human Collagen Type Ⅳ，Col Ⅳ ELISA Kit

人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒Human Collagen Type Ⅲ，Col Ⅲ ELISA Kit

人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 Human Laminin，LN ELISA Kit

人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒Human Fibronectin，F(xiàn)N ELISA Kit

人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 Human ovalbumin specific IgG，OVA sIgG ELISA Kit

人粒細胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒 Human granulocyte specific antinuclear antibody，GS-ANA ELISA Kit

人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒Human Blocking antibody，BA ELISA Kit

人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒Human ovalbumin specific IgE，OVA sIgE ELISA Kit

人抗中性粒細胞顆?？贵w(ANGA)ELISA試劑盒Human anti-neutrophil granules antibody，ANGA ELISA Kit
小鼠乳腺癌細胞OST-beta  有機溶質轉運蛋白OSTβ抗體 0.2ml

AANAT  芳香胺N-乙?；D移酶抗體 0.2ml

AT2R2  血管緊張素Ⅱ受體2抗體 0.2ml

Influenza A virus (Duck)  鴨流感病毒抗體 0.2ml

TNF-alpha  腫瘤壞死因子-α抗體 0.1ml

AARS2  丙氨酰tRNA合成酶2抗體 0.2ml

TDRD9/HIG1  缺氧誘導蛋白HIG1抗體 0.2ml

SIRT1/sirtuin 1  沉默調節(jié)蛋白1抗體 0.1ml