商品介紹：

細胞凍存注意事項：
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

公司正在出售的產品：

細胞應激反應蛋白抗體　英文名；SCARA3TIP60抗體　英文名；KAT5 / Tip60

細胞增殖誘導蛋白40抗體　英文名；DARSTMEFF1蛋白抗體　英文名；TMEFF1

細胞增殖誘導蛋白5/肺癌相關蛋白10抗體　英文名；MAEATMEM15/跨膜蛋白15抗體　英文名；DOLK

細胞增殖誘導蛋白54抗體　英文名；PIG54/SCC112TMEM157蛋白抗體　英文名；TMEM157

細胞粘附分子1抗體　英文名；TSLC1TMTC1蛋白抗體　英文名；TMTC1

細胞粘附分子2抗體　英文名；CADM2TMUB2蛋白抗體　英文名；TMUB2

細胞粘附分子3抗體　英文名；CADM3TNRC18蛋白抗體　英文名；TNRC18

細胞粘附分子4抗體　英文名；Cell adhesion molecule 4TNRC6C　英文名；TNRC6C

細胞粘附分子CD112抗體　英文名；CD112Toll蛋白相互作用蛋白抗體　英文名；Tollip

細胞粘附分子伴侶蛋白1抗體　英文名；Sidekick 1Toll樣蛋白受體10抗體　英文名；TLR10/CD290

細胞粘附分子相關蛋白/癌基因下調蛋白抗體　英文名；CDONToll樣受體11抗體　英文名；TLR11

GC-1 spg小鼠精原細胞系細胞粘合素(固生蛋白)抗體　英文名；Tenascin CToll樣受體1抗體　英文名；TLR1

細胞粘合素/腱糖蛋白-C/固生蛋白抗體　英文名；Tenascin CToll樣受體2（CD282）單克隆抗體　英文名；TLR2

操作步驟:

(1) 細胞系培養：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液，37℃ CO2培養密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液：用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。

B液：用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養液。

(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。

(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。