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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TIL-5豬白介素-5ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | IL-5豬白介素-5ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Porcine Interleukin 5, IL-5 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-P64731 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體英文全稱EGR4英文簡稱EGR4檢測范圍5972nmol/L-4000pg/mL
KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體英文全稱rat ED-1英文簡稱rat ED-1檢測范圍5973nmol/L-48ng/mL
胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體英文全稱undercarboxylated matrix Gla protein英文簡稱ucMGP檢測范圍5974nmol/L-200ng/ml
鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體英文全稱HMGR英文簡稱HMGR檢測范圍5975nmol/L-20ng/mL
離子通道蛋白Kv1.3抗體英文全稱Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class F protein英文簡稱PIGF檢測范圍5976nmol/L-2000pg/mL
磷酸化KLF5抗體英文全稱Cytoglobin英文簡稱CYGB檢測范圍5977nmol/L-48ng/mL
肺Kruppel樣因子抗體英文全稱CK-BB英文簡稱CK-BB檢測范圍5978nmol/L-800U/L
ATP敏感鉀離子通道蛋白抗體英文全稱apoA1P英文簡稱apoA1P檢測范圍5979nmol/L-32ng/mL
轉(zhuǎn)錄因子GATA3結(jié)合蛋白G3B抗體英文全稱Histone Deacetylase英文簡稱HDAC檢測范圍5980nmol/L-80ng/mL
激肽釋放酶12抗體英文全稱DNA Methyltransferase英文簡稱DNMT檢測范圍5981nmol/L-20ng/mL
激肽釋放酶2抗體英文全稱Cocaine And Amphetamine Regulated Transcript英文簡稱CART檢測范圍5982nmol/L-1000pg/mL
激肽釋放酶13抗體英文全稱Anti mutated citrullinated vimentin英文簡稱MCV-Ab檢測范圍5983nmol/L-400ng/ml
激肽釋放酶15抗體英文全稱NOX英文簡稱NOX檢測范圍5984nmol/L-2000pg/mL
激肽釋放酶5抗體英文全稱Mineralocorticoid Receptor英文簡稱MR檢測范圍5985nmol/L-8ng/mL
磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體英文全稱phosphorylated Signal Transducer And Activator Of Transcription 2 800pg/mL英文簡稱p-STAT2檢測范圍5986nmol/L-800pg/mL
磷酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體英文全稱STAT2英文簡稱STAT2檢測范圍5987nmol/L-1000pg/mL
人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒Survivin (71G4B7) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
人雌三(E3)ELISA試劑盒Hexokinase II (C64G5) Rabbit mAb20 ul
人雌二(E2)ELISA試劑盒Hexokinase II (C64G5) Rabbit mAb100 ul
人雌二受體(ER)ELISA試劑盒Phospho-c-Abl (Tyr245) (73E5) Rabbit mAb100 ul
人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAb100 ul
人紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb20 ul
人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAb100 ul
人紅細(xì)胞激因子(ESF)ELISA試劑盒 MEK1/2 (D1A5) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
IL-5豬白介素-5ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理大鼠血管內(nèi)皮生長因子B(VEGF-B)ELISA Kit,48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
人血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Hypoxylon investiens
鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Paracoccus pantotrophus (
大鼠血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Nocardiopsis fildesensis
人血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)ELISA Kit,48T/96T 用途: 用于餅粕發(fā)酵。
鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Syophobacter sulfatireducens
大鼠血管內(nèi)皮生長因子D(VEGF-D)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
人血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Erythrobacter gaetbuli
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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