ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
EnrobacragglomeransEwingandFife 成團(tuán)腸桿菌(成團(tuán)泛菌)EnrobacragglomeransEwingandFife安全等級:1模式菌株:no2生長條件:37℃ 純度：98%

Enrobacr sakazakii 阪崎腸桿菌Enrobacr sakazakii凍干安全等級:1模式菌株:no營養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 10.0 g，牛肉提取物 3.0 g，NaCl 5.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾 1.0 L，pH 7.0生長條件:37℃，好氧 純度：98%

Rhizoctoniasolani 棉花立枯菌Rhizoctoniasolani安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法生長條件:25-28℃ 純度：Ir 35% in HCl

Penicillium nalgiovense 納地青霉Penicillium nalgiovense凍干安全等級:1模式菌株:no綜合PDA：20%馬鈴薯汁 1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g ，硫胺素 微量，瓊脂15g， pH 6生長條件:25-28℃ 純度：Ir 35% in HCl

Fusariumoxysporum 香蕉枯萎病Fusariumoxysporum安全等級:1模式菌株:no4號種培養(yǎng)方法生長條件:25-28℃ 純度：95%

Verticilliumlecanii 蠟蚧輪枝孢菌Verticilliumlecanii安全等級:1模式菌株:no17生長條件:25-28℃ 純度：95%

Shigelladysenriae 痢疾志賀氏菌Shigelladysenriae凍干物安全等級:2模式菌株:no《GB4789.28培養(yǎng)基:和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。CM0002;營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:35-37℃;好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：95%

Shigella sonnet 宋氏志賀氏菌Shigella sonnet凍干安全等級:1模式菌株:no營養(yǎng)肉汁瓊脂 ：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件:37℃，好氧 純度：99%
CK17人細(xì)胞角蛋白17ELISA試劑盒實(shí)驗原理血瓊脂基礎(chǔ) (CM0055)金雀花(野靛)N-芴甲氧羰基-O-(芐基磷酰基)-L-絲氨NADPH peptide  還原型輔酶Ⅱ抗原

麥芽浸膏肉湯 (CM0057)秋水仙N-芴甲氧羰基-O-(芐基磷酰基)-L-絲氨proCNP/NPPC (pro-natriuretic peptide)  促尿鈉排泄肽前體C抗原

麥芽浸膏瓊脂 (CM0059)薯蕷皂苷元N-芴甲氧羰基-O-(芐基磷酰基)-L-絲氨NPY2R(Neuropeptide Y Receptor Type 2)  神經(jīng)肽Y受體2（多肽）

蛋白胨水 (Andrade)薯蕷皂苷甲叉膦NPY1R (neuropeptide Y1 receptor)  神經(jīng)肽Y1受體抗原

Nutirent Broth No.2 2 號營養(yǎng)肉湯原薯蕷皂甙4-氨基-3--5-甲NQO1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase l)  醌氧化還原酶抗原

伊紅美蘭瓊脂 (Levine 培養(yǎng)基) (CM0069)蛇床子素4-氨基-3--5-甲NR1/NMDAR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  谷氨受體1（多肽）

尿素肉湯基礎(chǔ) (Christensen 瓊脂基礎(chǔ)) (CM0071)麝香3-四甲NR1/NMDAR1/GLUR1(N-Methyl-d-Asprtate receptor 1)  谷氨受體1抗原

葡萄糖胰蛋白胨肉湯 (CM0073)酚3-四甲NR1/NMDAR1  谷氨受體1
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)