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AAT酰基轉移酶檢測試劑盒微量法

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 15:51:42瀏覽次數:111次

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貨號 FS-01S63525
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產品名稱:AAT酰基轉移酶檢測試劑盒微量法

規格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63525
商品介紹:

測定意義

AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。

測定原理:

AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取:

1、細胞或組織樣品的制備:

培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

SSB IgG抗體心肌錨蛋白重復域1SSB IgG antibody

黑色代謝瘦受體Melanin metabolic enzyme

肌球蛋白重鏈I血管緊張Ⅱ受體2myosin heavy chainI

肌球蛋白重鏈Ib血管緊張Ⅱ受體1myosin heavy chainIIb

肌球蛋白重鏈IIa血管生成4myosin heavy chainIIa

肌球蛋白重鏈IIx可溶性肌球蛋白重鏈1myosin heavy chainIIx

肉棕櫚酰轉移-Ⅰ熱休克因子1carnitine palmitoyltransferase 1

直接高密度脂蛋白膽血管活性肽抑制劑inositol 1,4,5,-trisphosphate

直接低密度脂蛋白膽心肌肌凝蛋白輕鏈1inositol 1,4,5,-trisphosphate

大腸桿菌病缺血修飾白蛋白inositol 1,4,5,-trisphosphate

乙型流感病8-異構前列腺F2αinfluenza B virus

尿氧化血管內皮鈣粘著蛋白復合體Uricase

視黃脫氫5α平滑肌肌動蛋白retinoldehydrogenase5

甘油三酯α橫紋肌肌動蛋白Triglyceride

總膽平滑肌肌球蛋白Total cholesterol
AAT酰基轉移酶檢測試劑盒微量法氧化釤 40nm 球形,99.5%二基膦 95%AD(Human amiodarone) ELISA Kit  人乙呋酮

氧化鋱 99.9% metals basis乙基三基氯化膦 98%SA(Human Sialic acid) ELISA Kit  人唾液

氧化鋱 99.99% metals basis乙基三基化膦 95%SM(Human sphingomyelin) ELISA Kit  人鞘磷脂

氧化鋱 99.999% metals basis乙基三基溴化膦  98%UFC(Human urinary free cortisol) ELISA Kit  人尿游離皮質

氧化銩 99.9% metals basis2-巰基并噻唑 98%ASCA(Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody) ELISA Kit  人抗釀酒酵母抗體

氧化釔 SP甲基三基溴化鏻 98%VLA4(Human very late appearing antigen 4) ELISA Kit  人遲現抗原4

氧化釔 99.99% metals basis甲基三基化鏻  98%AO(Human Acrine Orange) ELISA Kit  人吖橙

氧化釔 40nm 球形,99.5%焦磷 90%MTX(Human methotrexate) ELISA Kit  人喋呤

 


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