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布氏桿菌染色液

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 16:08:41瀏覽次數:192次

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貨號 FS-X10122
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產品介紹:

用途:

布氏桿菌染色,又稱為科茲洛夫斯基染色或柯茲洛夫斯基染色。

注意事項:

染色結果為:布氏桿菌呈球桿狀,淡紅色,其他呈綠色。

儲存條件:室溫,避光,12個月

中文名稱:布氏桿菌染色液

英文名稱:

產品規格:2×50ml|2×100ml

貨號:FS-X10122

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

薄層菌屬絲裂原活化蛋白激3抗體Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) 犬組織因子(TF)免疫試劑盒

總狀毛霉雌激受體α抗體Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) 犬組(HIS)免疫試劑盒

土壤短芽胞桿菌雌激受體β 抗體Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) 犬轉移生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒

根霉上皮特異性抗原抗體Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) 犬腫瘤壞死因子α(TNF-α )免疫試劑盒

頭孢霉內皮-1抗體Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) 犬脂多糖/內(LPS)免疫試劑盒

黑曲霉天冬蛋白家族蛋白抗體Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) 犬脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒

迂回殼囊孢蝮蛇蛇蛋白抗體Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) 犬孕激/孕(PROG)免疫試劑盒

巴貝斯蟲未定種(伊寧株)轉錄因子E2F-2抗體Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) 犬誘導型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒

天麻蜜環菌A9*內皮受體蛋白酪激抗體Human INSM1(Insulinoma-associated protein 1) 犬游離脂肪(FFA)免疫試劑盒

棒彎孢酪蛋白激受體B2抗體Human HMGCS2 (Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, mitochondrial) 犬游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒

蠟狀芽孢桿菌磷化雌激受體ER alpha 抗體Human INSM2 (Insulinoma-associated protein 2) 犬游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒

須芒草伯克霍爾德氏菌重組增強型綠色熒光蛋白抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) 犬抑制β-B(Inhbb)免疫試劑盒

綠針假單胞菌雌激受體α抗體(用于western blot)Human HRAS(GTPase HRas) 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒

雞葡萄球菌雌激受體α/β抗體Human HSD17B1(Estradiol 17-beta-dehydrogenase 1) 犬乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒

擬枝孢鐮孢自分泌運動因子抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) 犬胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫試劑盒

平菇—紫孢側耳酪蛋白激A3受體抗體Human UGT1A1(UDP-glucuronosyltransferase 1-1) 犬胰高血糖樣肽1(GLP1)免疫試劑盒

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:分析標準品,99.5%吳茱萸總堿

假蜜環菌Armillariella│sp. 質量規格:分析標準品,99.8%蘇糖

副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質量規格:分析標準品,≥98%阿卡波糖
布氏桿菌染色液松口蘑 3,4,5-三苯中性蛋白

巴斯德畢赤酵母 3-甲基噻吩抗壞血氧化

滑假絲酵母 N-氨基-3-氮雜雙環[3.3.0]辛烷鹽鹽D-半乳糖酯還原

糙皮側耳 3,4-二肌加氧

孢籃狀 4-氨基-3-溴三氟甲苯麥角蛋白

美澳型核果褐腐病 4-羥基-2-甲姜辣

海境芽孢桿 5-羥基-2-甲果聚糖

大腸埃希 磺脒Na-K-ATP

鄰單胞屬* 枸櫞鉍葡萄糖

葡萄座腔 D-對羥基苯甘甲酯鹽鹽木質

大腸埃希 2-甲酯類黃酮葡萄糖轉移

動物源細耐藥性檢測板-金黃色葡球 5,5-二苯基海因霉

矩圓黑盤孢 4--3-溴甲苯ataxin-3抗體

卡爾斯伯酵母 2-甲氧基苯過氧化物

黃曲霉 4-甲苯果糖-1,6-二磷縮

 


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