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規格:96T/48T
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷
運輸:快遞(根據客戶要求,選擇具體的運輸方式)
試劑盒種屬:羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等
產品名稱 | 小鼠α干擾素(IFN-α)elisa進口試劑盒 |
英文名稱 | Mouse interferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit |
貨號 | BJ-G9793 |
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時;更長時間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋,從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋( 示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋(示例:1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實驗前準備:
ELISA進口試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
HDBEC Pellet 人皮膚血管內皮細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 前脂肪細胞培養基PAM-prf碳酸氫銨(AR)質量規格:ARAmmonium bicarbonate
CL-0348Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化))5×106cells/瓶×2氯化銨(AR)質量規格:>99.5%,ARAmmonium chloride
B3GALT5 Others Human 人 B3GALT5 人細胞裂解液 (陽性對照) 水楊酸(AR)質量規格:>99.5%,ARSalicylic acid
人氣管上皮細胞總RNAHTEpiC NAL-1酸質量規格:>99%,ARL-Tartaric acid
盤羊皮膚細胞;OAM-S1 大鼠成肌細胞,L6細胞 TM4細胞,正常小鼠Leydig細胞二甲基脲質量規格:>98%,BRN,N'-Dimethylurea
人小腦星形膠質細胞RNAHA-c miRNA5 μg珊瑚菜內酯,珊瑚菜素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品phelloptorin
LMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人細胞裂解液 (陽性對照) 鞣花酸(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Ellagic acid
人大隱靜脈平滑肌細胞*培養基 100mL右旋延胡索乙素(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品D-Tetrahydropalmatine
Mo-MuLV/3T3細胞,小鼠Mo-MuLv感染的3T3細胞 T/G HA-VSMC(人主動脈血管平滑肌細胞) 人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H2087對溴芐胺 質量規格:>98%4-Bromobenzylamine
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標簽)2”-O-沒食子酰基金絲桃苷(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品2”-O-Galloylhyperin
CM-M004小鼠氣管上皮細胞*培養基100mLBLUESTEPPROTEINMWMARKER,HIGHRANGE,PRESTAINED蛋白Marker電泳級暗藍色液體FROZENsigma
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照) N,N-二基炳1基脲 1,3-Dimqthyl-3,4,5,6-tqtrcxy7no-2(1H)-pyrimidinonq 1976/3/2
成纖維細胞培養基FM2-磺醋內 Mqsnc 19767-42-4
PC-3M細胞,人前列腺癌細胞 兔主動脈平滑肌細胞,CCC-SMC-2細胞 人真皮成纖維母細胞-HDF-a2'-脫氧尿嘧啶核苷-5'-三嶙酸四鈉鹽,英文名或英文縮寫:dUTP,4Na,級別:0.98,規格:500毫克
HFT-8810(人胎兒胸腺細胞株) 5×106cells/瓶×251-65-0DL-4-扶本DL-3-(4-Fluoropxenyl)alanine
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa進口試劑盒CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2硫酸頭孢匹羅(標準品)Cefpirome Sulfate質量規格:效價測定
mCF, 小鼠心臟成纖維細胞阿米舒必利Amisulpride質量規格:含量≥900μg/mg,度大于99%,USP32
人胚腎上皮細胞系;KiMA 人直腸粘膜上皮細胞*培養基 100mL阿米舒必利(標準品)Amisulpride質量規格:>98%,標準品
人纖維肉瘤細胞;HT-1080非諾貝特酸Fenofibric acid質量規格:>98%,BR
ITGA5&ITGB6 Others Human 人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 非諾貝特酸(標準品)Fenofibric acid質量規格:HPLC>98%,標準品
實驗步驟:
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr;
2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;
3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇 5min,95%乙醇 2 次(每次 2min),85%乙醇 2 min;75%乙醇 2min,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min;
4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到 98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O 洗 2×2min,TBS 洗滌(2×2min)(具體修復方法見附 1)* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第 5 步封閉。
5.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 30 min;
6.加一抗:滴加用試劑 C(即用型一抗),37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜;
7.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
8.封閉: 滴加試劑 B,37℃濕盒孵育 10 min;
9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑 D),37℃濕盒中孵育30 min;
10.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min);
11.封閉: 滴加試劑 Tween 20,37℃濕盒孵育封閉 20 min;
12.加 HRP-SA: 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E(1:50~200,終濃度 5~20 nM),37℃濕盒中孵育 30 min;
13.洗滌: TBS-T 洗滌(3×5 min),TBS 洗滌(2×5 min);
14.顯色:應用 DAB 溶液(試劑 F)顯色;
15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;
16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;
17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。
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