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上海邦景實業(yè)有限公司
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遲鈍愛德華菌熒光定量PCR試劑盒探針法

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-07-11 15:58:07瀏覽次數(shù):98次

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產(chǎn)地 國產(chǎn) 加工定制
適用領域 科研 貨號 BJ-P9503
遲鈍愛德華菌熒光定量PCR試劑盒探針法公司正在出售的產(chǎn)品:2 ug pBAsi-mU6 pBAsi-mU6 低溫運輸,-20℃保存25次 一站式動物mRNAout One-Stop Animal mRNA Isolation Kit 4℃保存2 ug pCMV-HA-C pCMV-HA-C 低溫運輸,-20℃保存CCDA添加劑 CCDA Supplement 2ml*5支250g 蛋白胨 Pept

實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

貨號

遲鈍愛德華菌熒光定量PCR試劑盒探針法

Edwardsiella tarda

多種規(guī)格

BJ-P9503

QQ截圖20191204143322.jpg

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

特點優(yōu)勢:

1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。

2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

1.jpg



 

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物110pM              2μl

引物210PM             2μl

Taq酶(2U/μl           1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O              50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min

3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

三、注意事項

1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。

3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。

4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。

5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。

7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。

 

 

操作流程

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 所有試劑在使用應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

JYBL-Ⅰ脫鈣液500ml

JYBL-Ⅱ脫鈣液500ml

JYBL-Ⅳ脫鈣液500ml

電解脫鈣液(甲酸法)500ml

JYBL-Ⅲ脫鈣液500ml

電鏡脫鈣液100ml|500ml

脫鈣后堿處理液500ml

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液3×10ml|3×20ml

酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)3×10ml|3×20ml

β-半乳糖苷酶染色試劑盒(細胞專用)100T

遲鈍愛德華菌熒光定量PCR試劑盒探針法 IL4 基因全長ORF克隆石蠟切片組織衰老特異性脂褐素靛原位直接染色試劑盒  50

IL18 基因全長ORF克隆細胞衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒  50

IL5 基因全長ORF克隆(與紅細胞無法分別)  

IL1B 基因全長ORF克隆全組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒  10

IL1A 基因全長ORF克隆冰凍切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒  50

IL21 基因全長ORF克隆石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位間接染色試劑盒  10

IL6 基因全長ORF克隆石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位直接染色試劑盒  50

IL2 基因全長ORF克隆細胞衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒  50

大鼠 IL20Ra 基因全長ORF克隆(與紅細胞無法分別)  

食蟹猴 CD3E 基因全長ORF克隆全組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒  10

大鼠 LAMP1 基因全長ORF克隆冰凍切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒  50


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