凍干品Benzonase核酸酶

商品屬性：

商品介紹：

Benzonase 核酸酶是經基因工程改進的核酸內切酶。它能降解所有形式(包括單鏈，
雙鏈，線性和環狀)的 DNA 和 RNA 而沒有蛋白裂解活性，
在廣泛條件范圍具有很高的特異性。它將核酸消化成3-5 堿基長度（雜交限度以下）的 5’-單磷酸寡核苷酸，適合從重級蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 關于核酸污染的處理規程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使該酶成為降低粘度以減少處理時間和增加蛋白產量的選擇。
單位定義：在 30 分鐘內使△ A260 值降低 1.0(相當于消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
注意：含大量蛋白、細胞壁、其它鹽分的粗制品，對該酶有部分抑制作用，使用時需要增加酶的用量。
應用
蛋白提取時去除核酸污染
2D 凝膠電泳
Western Blot
IP- Western
儲存：本品為凍干品形式，在凍干品未溶解狀態下，可置于
-20°C 長期保存，可以室溫保存 1 個月，因此可在室溫條件下運輸。
溶解：本品可使用 400 μl 的 ddH2O 溶解，溶解后該酶的濃度為 250U/μl。使用 ddH2O 溶解后的制品可在-20°C 保存 3個月，長期保存請置于-60°C 以下。本品亦可使用 400 μl 的20%甘油溶解，溶解后的制品可在-20°C 條件下保存 2 年。
操作方法
1. 組織處理方法：將 30-50mg 動植物組織研磨充分后，加入 100-200 μl RIPA 裂解液(,C2501)，同時加入溶解后的 1 μl Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
2. 細胞處理方法：將 106-107 懸浮細胞液 6,000 rpm 離心10min 后，棄掉上清液，使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細胞，同時加入溶解后的 1μl Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
注意：貼壁細胞重懸于 PBS 后，處理方法同懸浮細胞。
3. 大腸桿菌細胞處理：將 500 μl E.coli 培養液 8,000rpm 離心 5min 后，棄掉上清液，使用 100 μl 大腸桿菌裂解液(,C2301)重懸細胞，同時加入溶解后的 1μl
Benzonase 核酸酶，旋渦振蕩混合均勻，室溫孵育 30min。
4. 裂解步驟完成后，將裂解產物于 13,000 rpm 離心 10min后，取上清即為提取蛋白（包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白）。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量試劑盒(,C3001)測定蛋白濃度。
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