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兔骺軟骨細胞

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-07 16:48:32瀏覽次數:118次

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貨號 BJ-X97072
兔骺軟骨細胞公司*的商品:培養基1(USP) 250g1瓶 CRFK細胞株 CRFK 低溫運輸和保存MRS瓊脂平板(9cm) MRS Agar 10個/包500U 堿性,偶聯級 Alkaline Phosphatase,Conjugation Grade 4℃保存改良克氏雙糖鐵培養基 Modified KIA Iron Medium 250g

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產品名稱

兔骺軟骨細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

貨號

BJ-X97072

商品屬性:

名稱    兔骺軟骨細胞

2.組織來源:生長板組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

兔骺軟骨細胞分離自骨骺生長板;骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細胞可分裂、成熟、肥大,最終被骨組織所替換,對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內,這些骺軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,骺軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的骺軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

()實驗室分離的兔骺軟骨細胞采用膠原酶-聯合消化并軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的兔骺軟骨細胞型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-Rb016

換液頻率每3-4天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

細胞培養步驟:

.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

圖片13.jpg 

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CEACAM6 / CD66c ELISA配對抗體

IL6R / CD126 ELISA配對抗體

CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配對抗體

MICB / MIC-B ELISA配對抗體

IGF1R / CD221 / CD221 ELISA配對抗體

甲型流感 H5N1 () 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體

甲型流感 H1N1 (豬流感 2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對

兔骺軟骨細胞Salmonella enteritidis腸炎沙門氏LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周C4orf33  4號染色體開放閱讀框33抗體 規格: 0.2mlGoat Anti-rabbit IgG/Cy5  Cy5標記的羊抗兔IgG 規格: 0.1ml

Aspergillus flavus黃曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周DAO1/ABP1  阿米洛利結合蛋白1抗體 規格: 0.2mlperipherin  外周蛋白抗體 規格: 0.1ml

Fructus viticis蔓荊子探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周PCK1  磷酸烯醇丙酮酸羧激抗體 規格: 0.2mlGPD1  甘油三磷酸脫1抗體 規格: 0.2ml

Enterotoxigenic E.coli(ETEC)產腸性大腸桿(大腸埃希氏)LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase  丙型毒NS4B(65kDa)抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗人IgM 規格: 0.1ml

Bonamia ostreae牡蠣包拉米蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周STAT4  信號轉導和轉錄激活因子4抗體 規格: 0.1ml

Duck Hepatitis B Virus cccDNA(DHBV cccDNA)鴨乙型肝炎病毒cccDNA 染料法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Bovine IgM/AP  堿性磷酸(AP)標記的兔抗牛IgM 規格: 0.1ml

魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周c-Raf/Raf1  基因c-Raf抗體 規格: 0.1ml

Haemophilus suis豬嗜血桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周C6orf174  6號染色體開放閱讀框174抗體 規格: 0.2ml

Phomopsis sclerotioides黃瓜黑色根腐病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-3周STARD5  促黃體激素誘導蛋白5抗體 規格: 0.2ml

Fructus cannabis火麻仁PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 20度 一年 2-4周IFI44  干擾素誘導蛋白44抗體 規格: 0.2ml

操作要點:

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

 


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