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貨號 | BJ-X97674 |
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產品名稱 | |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
貨號 | BJ-X97674 |
商品屬性:
名稱 子宮內膜間質細胞 2.組織來源:子宮組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人子宮內膜間質細胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的最內層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養的子宮內膜間質細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡介: ()實驗室分離的人子宮內膜間質細胞采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: ()實驗室分離的人子宮內膜間質細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H233 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 消化液0.25% 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備DMEM-H培養基(DMEM-H:GIBCO,貨號12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
大鼠白介素26(IL-26)免疫試劑盒現貨供應
人抗麥角蛋白(Gliadin)抗體(IgA)免疫試劑盒進口、組裝
人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)免疫試劑盒現貨供應
人Corin 免疫試劑盒進口、組裝
大鼠脂酰輔A合成(ACS)免疫試劑盒現貨供應
大鼠金屬轉運蛋白1(MTP1)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠1,4,5-三肌醇(IP3)免疫試劑盒現貨供應
PBS-Tween20洗液 英文名稱:PBS-Tween20 lotion 產品規格:250g
3%NaCl氨基酸脫羧對照 英文名稱: 產品規格:2?恣?翶??#?????鸁????
子宮內膜間質細胞Bovine Rhinitis Virus (BRV)牛鼻炎病毒通用 RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy7 Cy7標記的驢抗豚鼠IgG 規格: 0.1ml
Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV )傳染性脾腎壞死病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Lamin B Receptor 核纖層蛋白B受體抗體 規格: 0.2ml
Simian Foamy Virus(SFV)猴泡沫病毒RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-Ephrin B(Tyr329) 磷酸化Ephrin B抗體 規格: 0.1ml
虎源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ABCB5 ATP結合蛋白家族5抗體 0.1ml
Tanapox Virus(TPV)塔那痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CD57/HNK1 髓鞘相關糖蛋白CD57抗體 規格: 0.1ml
Pseudomonas marginalis pv. marginalis邊緣假單胞邊緣致病變種 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周RNF14 環指蛋白14抗體 規格: 0.2ml
Flos buddlejae密蒙花PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Phospho-Nur77(Ser351) 磷酸化孤兒核受體蛋白Nur77抗體 規格: 0.1ml
Mud Crab Dicistrovirus (MCDV)青蟹雙順反子病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PDE4A 磷酸二酯4A抗體 規格: 0.1ml
Parainfluenza Virus(PIV)副流感病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-IKK beta(Tyr188) 磷酸化KB抑制蛋白激β抗體 規格: 0.1ml
Semen ginkgo白果探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Avidin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗親和素 規格: 0.1ml
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
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