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大鼠熱休克蛋白70elisa檢測試劑盒實驗試劑準和操作步驟

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大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒試劑準備:
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
1. 標準品復溶:試劑盒提供6管標準品,每管已標定濃度,并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL樣本稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動助其溶解,使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測試劑盒操作步驟:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃;                      2. 設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL; 3. 待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;                                                    4. 隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。                                         5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。                                                                                     6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。                                                     7. 所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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