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elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟的誤差

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elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟的誤差
1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。
一般來說,elisa試劑盒廠家的elisa試劑盒操作技術(shù)員會(huì)在一切準(zhǔn)備就緒后開始實(shí)驗(yàn),而在實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)時(shí)卻常會(huì)出現(xiàn)一些問題。由于ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟復(fù)雜,可能一個(gè)小小的誤差就會(huì)出現(xiàn)大問題,那么我們要如何解決并完善實(shí)驗(yàn)步驟的誤差問題呢?今天elisa試劑盒廠家?guī)Ыo您的資訊主題是:寶貝們抓緊看!小技巧改變elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差大問題。
①:由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫動(dòng)等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)應(yīng)使用加樣器。
②:閾值附近實(shí)際上是個(gè)灰區(qū),不能截然分為陰性、陽性,國外elisa試劑盒廠家均要求對(duì)這部分可疑標(biāo)本進(jìn)行奇數(shù)次復(fù)檢,以次數(shù)多者為準(zhǔn),如一次陽兩次后判為陰,但實(shí)際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時(shí)間后再測。
③:肉眼觀察稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)際工作中是難以避免的,肉眼目測結(jié)果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
④:不同的elisa試劑盒廠家產(chǎn)品其生產(chǎn)工藝和操作方法會(huì)略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
⑤:加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。
⑥:反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
⑦:由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關(guān)。

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