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小鼠檢測試劑盒標本收集及處理

時間:2021/11/3閱讀:321
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小鼠檢測試劑盒標本的采集與保存:

1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4oC 過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。

2、血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的 30 分鐘內于 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。

3、組織勻漿:

1)、取適量組織塊,于預冷 PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);

2)、可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入 5-10mL 預冷 PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復 2 次)。

3)、將制備好的勻漿液于 5000×g 離心 5 分鐘,留取上清即可檢測。

4、其它生物標本:請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。

小鼠檢測試劑盒標本處理:

1、本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。

2、實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本0.01mol/L 的 PBS 稀釋(PH=7.0-7.2)。

3、若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。

4、使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致 ELISA 實驗結果偏差。

5、若樣本為細胞培養上清,因該類樣本干擾因素 較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。

6、某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。

7、建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏 差。


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