1、原理及適用范圍
菌落總數(shù)是指樣品經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后所得1mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù)，是的微生物檢測項(xiàng)目。菌落總數(shù)測試片（FilmplateTM Aerobic BB202）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有標(biāo)準(zhǔn)的營養(yǎng)培養(yǎng)基，冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑（TTC），菌落在測試片上呈紅色，這樣可縮短計(jì)數(shù)時(shí)間和增強(qiáng)計(jì)數(shù)效果。本產(chǎn)品適合于各類食品及食品原料中菌落總數(shù)的測定，也可用于檢測食品加工容器、操作臺和其他設(shè)備表面的菌落總數(shù)。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測定（GB 4789.2）。
2、操作方法
2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，必要時(shí)用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.6～7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的樣品勻液，以此類推，做出1:1000等稀釋度的樣品勻液，每次換一支吸管。
2.2、接種：一般食品選2～3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測。將菌落總數(shù)測試片（BB202）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固，每個(gè)稀釋度接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對照。
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h；水產(chǎn)品培養(yǎng)溫度為30℃±1℃，培養(yǎng)48h。
3、結(jié)果判讀
細(xì)菌在測試片上生長后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn)，選擇菌落數(shù)適中（30～300個(gè)）的測試片進(jìn)行計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升（或每克）樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。
4、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。
