——上皮細(xì)胞在氣-液界面長期培養(yǎng)的
全自動上皮細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)LTC-C是一套由計算機(jī)控制,細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)插件transwell(cell culture inserts,也稱細(xì)胞培養(yǎng)池)上,進(jìn)行長期的氣液界面培養(yǎng)系統(tǒng)。系統(tǒng)由多達(dá)四個細(xì)胞培養(yǎng)模塊,一套控制單元和一個可嵌入瀏覽器的控制軟件構(gòu)成。通過軟件控制,系統(tǒng)可自動完成培養(yǎng)基的更換(全部或部分),并通過超聲波傳感器控制培養(yǎng)基的高度(偏差在0.2mm)。儲存器(可置于冰箱內(nèi))內(nèi)的新鮮培養(yǎng)基,通過蠕動泵輸入到控制單元內(nèi)被溫和加熱,然后根據(jù)軟件設(shè)置的參數(shù)供給到CO2培養(yǎng)箱內(nèi)的培養(yǎng)模塊中。
圖1:控制單元由培養(yǎng)基供給泵和排液泵、信號處理器、控制中心(電腦及軟件)構(gòu)成。整個控制單元可進(jìn)行遠(yuǎn)程網(wǎng)絡(luò)控制,控制界面簡潔易操作。雙泵內(nèi)置,設(shè)有漏液防護(hù)裝置,保證實驗安全進(jìn)行。整個系統(tǒng)可拆卸,易于保養(yǎng)維護(hù)。
培養(yǎng)模塊有24個細(xì)胞培養(yǎng)插件transwell位置,能使用不同品牌的不同型號,如Corning或BD的6.5mm和12mm。四個培養(yǎng)模塊可由一個控制系統(tǒng)單元控制,包括培養(yǎng)基輸送泵,加熱器,分配器。系統(tǒng)中,所有直接接觸細(xì)胞的部分口可以進(jìn)行70%酒精清洗或高溫高壓**。所有這些材質(zhì)都經(jīng)過適用細(xì)胞培養(yǎng)的相容性測試Exp Toxicol Pathol. 2013 Nov;65(7-8):973-8.)。
圖2:Cultex細(xì)胞在氣-液界面長期持續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)LTC-C。系統(tǒng)組成部分:電腦(含軟件)、控制器、細(xì)胞培養(yǎng)模塊、培養(yǎng)基供給瓶及廢液收集瓶、CO2培養(yǎng)箱。細(xì)胞培養(yǎng)模塊包含24孔培養(yǎng)室、氣泡排除室、超聲波脈沖反射傳感器及轉(zhuǎn)動器和底座構(gòu)成,耐高溫高壓。系統(tǒng)同時為插入式24孔培養(yǎng)皿(12孔制式,e.g. Costar® or Falcon®)具有相同的培養(yǎng)環(huán)境。Cultex LTC-C連接到控制單元,可設(shè)置換液的時間間隔和換液量。
圖3:CULTEX® LTC-C的運行。細(xì)胞培養(yǎng)模塊至于CO2培養(yǎng)箱內(nèi),在生理學(xué)環(huán)境下有電腦自動控制培養(yǎng)液的換液頻率、換液量,根據(jù)不同細(xì)胞特性及研究目的進(jìn)行長時間連續(xù)性的細(xì)胞培養(yǎng)。
全自動上皮細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)CULTEX® LTC與傳統(tǒng)手動培養(yǎng)技術(shù)的差別:
手動培養(yǎng) | 自動培養(yǎng) |
手動操作,不確定因素較多,重復(fù)性低 | 全自動控制,實驗重復(fù)性高 |
蒸發(fā)影響 | 培養(yǎng)基水平穩(wěn)定 |
人為影響 | 計算機(jī)控制 |
培養(yǎng)基需要人為預(yù)加熱 | 加熱有系統(tǒng)自動控制 |
12或24孔位置內(nèi)孔間差異較大 | 孔間條件相同,差異較小 |
費時且實驗成本高 | 實驗成本及耗時小 |