公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
| 產(chǎn)品名稱 | 人膀胱癌細(xì)胞：5637 |
| 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 分類 | 細(xì)胞系 |
| 貨號(hào) | GOY-01X0002 |
商品介紹：
| 名稱5637 (人膀胱癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) 種屬人類 年齡（性別）男性，68歲 組織來源膀胱；癌 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述5637細(xì)胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 生物安全等級(jí)1 生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~24-36小時(shí) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. 注意事項(xiàng)該細(xì)胞較難消化，注意延長(zhǎng)消化時(shí)間，消化到細(xì)胞收縮變圓，輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊，細(xì)胞可以滑落方可終止消化。 |
使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
AR42J (大鼠胰腺外分泌細(xì)胞) 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞：AR42J 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
ARPE-19 (人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞) 人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞：ARPE-19 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
AsPC-1 (人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞) 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞：AsPC-1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
AtT-20 (小鼠垂體瘤細(xì)胞) 小鼠垂體瘤細(xì)胞：AtT-20 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
B16 (小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 小鼠黑色素瘤細(xì)胞：B16 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
Bcap-37 (人乳腺癌細(xì)胞) 人乳腺癌細(xì)胞：Bcap-37 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BEL-7402 (人肝癌細(xì)胞) 人肝癌細(xì)胞：BEL-7402 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BEL-7404 (人肝癌細(xì)胞) 人肝癌細(xì)胞：BEL-7404 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BGC-823 (人胃腺癌細(xì)胞(低分化)) 低分化：BGC-823 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BHK-21 [C-13] (倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞) 倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞：BHK-21 [C-13] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BIU-87 (人膀胱癌細(xì)胞) 人膀胱癌細(xì)胞：BIU-87 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BRL 3A (大鼠肝細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞：BRL 3A 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BNL CL.2 (小鼠胚胎肝細(xì)胞) 小鼠胚胎肝細(xì)胞：BNL CL.2 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BRL (大鼠肝細(xì)胞) 大鼠肝細(xì)胞：BRL 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BS-C-1 (非洲綠猴腎細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞：BS-C-1 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BT-474 [BT474] (人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞) 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞：BT-474 [BT474] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BT-549 (人乳腺管癌細(xì)胞) 人乳腺管癌細(xì)胞：BT-549 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
BxPC-3 (人原位胰腺腺癌細(xì)胞) 人原位胰腺腺癌細(xì)胞：BxPC-3 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
C127 [C-127] (小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞) 小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞：C127 [C-127] 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
C2C12 (小鼠成肌細(xì)胞) 小鼠成肌細(xì)胞：C2C12 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體
拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體
α-1抗胰抗體
α-1抗體
ATP結(jié)合蛋白家族6抗體
三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體
脂聯(lián)素受體2抗體
ANGEL1蛋白抗體
ANGEL2蛋白抗體
ANKLE2蛋白抗體
睪丸特異性錨樣蛋白1抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體
氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成酶6G抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體
丙型肝炎病毒核結(jié)合蛋白-1抗體
人膀胱癌細(xì)胞：5637芳香基硫酸酯酶K抗體
神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體
錨定蛋白G抗體
肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體
整合素樣金屬蛋白酶與型抗體
