南極熱敏UDG
商品屬性：
產(chǎn)品分類(lèi) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
核酸酶系列 | 100U | BJ-PJ6674 |
核酸酶系列 | 500U | BJ-PJ6674 |
商品介紹：
是來(lái)源于嗜冷海洋細(xì)菌經(jīng)大腸桿菌表達(dá)純化的的重組蛋白。
該酶能有效地水解單鏈或雙鏈DNA 上的niao嘧啶，產(chǎn)生的缺嘧啶位點(diǎn)，在高溫或高 pH下，極易水解斷裂。該酶對(duì) RNA 無(wú)活性，主要用于 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。大腸桿菌來(lái)源的niao嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱，經(jīng) 95℃10min 處理仍會(huì)殘留有少量的niao嘧啶-DNA 糖基化酶活性，導(dǎo)致含有 dU 堿基的 PCR 產(chǎn)物的降解。
而來(lái)源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型 UDG 在 50℃5min 即失活，在進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增前，在 PCR 混合液中添加niao嘧啶-DNA 糖基化酶（熱敏性），25℃ 2min 即可消除以往 PCR 產(chǎn)物的殘留污染，由于niao嘧啶-DNA 糖基化酶（熱敏性）在 PCR 循環(huán)的 94℃變性一步便可被滅活，因此不會(huì)影響新的含 dU 的 PCR 產(chǎn)物。
活性定義：在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系下，37°C 每分鐘催化 60 pmol niao嘧啶從含niao嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為一個(gè)活性單位。
反應(yīng) Buffer：
ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)與絕大多數(shù)的 PCR 聚合酶反應(yīng)緩沖液都是兼容的，但在高離子濃度(>100 mM)下活性會(huì)受到抑制。在防污染 PCR 中的使用濃度推薦為 10 mU-50 mU/μ（l 25℃下作用 2min 即可），在不同的緩沖系統(tǒng)下可能會(huì)有差別。
酶儲(chǔ)存液：20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
儲(chǔ)存：置于-20°C 可保存 2 年。
熱失活：50°C，5min。
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