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| 產品名稱 | Y190 感受態細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 酵母感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
shēng huà shì jì
shēng huà shì jì 1-溴代辛烷 容量： 1克
shēng huà shì jì 1-溴代萘 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 1-溴代庚烷 容量： 2～8℃ 250毫克
shēng huà shì jì 1-辛醇 容量： 0.5毫升
shēng huà shì jì 1-十一碳烯 容量： 2～8℃ 200毫升
shēng huà shì jì 1-十四烯 容量： 100T
shēng huà shì jì 1-十八烯 容量： 避光，-20℃ 25T
shēng huà shì jì 1-壬醇 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 1-羥基苯并三氮唑一水物 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 1-羥基-2-萘甲酸 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 1-萘* 容量： 保存：-20℃ 0.25毫升
shēng huà shì jì 1-萘酚 容量： 100毫克
shēng huà shì jì 1-甲基咪唑 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 1-甲基-2-吡咯烷酮 容量： 保存：-20℃ 50毫克
shēng huà shì jì 1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮 容量： 2～8℃ 5U
shēng huà shì jì 1-苯基-3-甲基-4-苯甲?；吝蜻?容量： 1克
shēng huà shì jì 1-苯基-3
SK-MES-1(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
SK-N-SH(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
SK-OV-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2
SMMC-7721(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
SPC-A-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
ST(豬睪細胞) 5×106cells/瓶×2
SY190 感受態細胞 100ul*50 TO(小鼠胚成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
SVEC4-10(小鼠淋巴結內皮細胞) 5×106cells/瓶×2
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2
SW480(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
SW579(人甲狀腺鱗癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2
SW620(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
SW626(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2
T-24(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2
T-47D(人細胞管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
T84(人結腸腺癌肺轉移細胞) 5×106cells/瓶×2
Tca-8113(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
TE-1(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
TF-1(人血液白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2
烷酮 容量： 50U
shēng huà shì jì 1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸鈉 容量： 25克
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
