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| 產品名稱 | BY4741 感受態細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 酵母感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
shēng huà shì jì 2′-脫氧胞苷-5′-三磷酸三鈉鹽 容量： 25克
shēng huà shì jì 2′-脫氧胞苷-5′-三磷酸二鈉鹽 容量： 5克
shēng huà shì jì 2′-脫氧胞苷-5′-二磷酸三鈉鹽 容量： RT 5克
shēng huà shì jì 2′-脫氧胞苷-5′-單磷酸二鈉 容量： 100克
shēng huà shì jì 2′-脫氧胞苷-5′-單磷酸 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 2′-脫氧胞苷 容量： 25克
shēng huà shì jì 2′5′-ADP瓊脂糖凝膠4B 容量： 5KU
BY4741 感受態細胞 100ul*50 shēng huà shì jì 2.0ml離心管 容量： 1KU
shēng huà shì jì 2.0ml凍存管 容量： 2KU
shēng huà shì jì 2,9-二甲基-4,7-二苯基-1,10-菲啰啉 容量： RT 100克
shēng huà shì jì 2，9-二甲基-1，10-菲羅啉 容量： 1升
shēng huà shì jì 2,8-二甲基喹啉 容量： 500克
shēng huà shì jì 2，6-二叔丁基對甲酚 容量： 500毫克
shēng huà shì jì 2,6-二氯醌-4-氯亞胺 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 2,6-二氯靛酚鈉鹽 容量： 25克
shēng huà shì jì 2,6-二氯靛酚 容量： 5克
shēng huà shì jì 2,5-雙(5-叔丁基苯并噻唑-2)噻吩 容量： 5克
shēng huà shì jì 2,5-雙(5-叔丁基-2-苯并惡唑基)噻吩 容量： 2～8℃ 10毫克
shēng huà shì jì 2，5-二羥基苯甲酸 容量： 25克
shēng huà shì jì 2,5-二甲基環己醇 容量： 保存：-20℃ 1克
shēng huà shì jì 2,5-二苯惡唑 容量： 500毫升
shēng huà shì jì 2，4-二硝基氯苯 容量： 1克
shēng huà shì jì 2，4-
OP9(小鼠骨髓基質細胞) 5×106cells/瓶×2
OS-RC-2(人腎癌細胞) 5×106cells/瓶×2
OVCAR-3(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2
P19(小鼠畸胎瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
PANC-1(人胰腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
PC-3(人前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
PIEC(豬髖動脈內皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2
PK-15(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2
QGY-7701(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
RBE(人膽管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
RF/6A(猴視網膜血管內皮細胞) 5×106cells/瓶×2
RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
RKO(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
肼 容量： 25克
注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
