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小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6操作步驟

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  • 更新時間2017-06-29
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小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6操作步驟 產品詳情

小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6操作步驟操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

產品名稱

生長特性

價格

小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6操作步驟

貼壁生長

電詢

細胞名稱   小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6操作步驟
形態特性 成纖維細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 1972年從C3H小鼠胚胎細胞中分離建立;在同系小鼠體內不能成瘤,未發現自發轉化;化學制劑很容易引起該細胞發生轉化,建議只用5~15代的細胞。

培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS

傳代方法 2000cells/cm2傳代;2~3天換液1次。

傳代情況 不詳

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養法(-

STR -

同工酶

染色體 69~78

使用權限 A

小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6操作步驟細胞培養
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基, 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
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