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結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞:DLD-1

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  • 型號(hào)
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時(shí)間2022-05-06
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限10
  • 實(shí)名認(rèn)證已認(rèn)證
  • 產(chǎn)品數(shù)量10000
  • 人氣值315879
產(chǎn)品標(biāo)簽

結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞DLD-1

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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。    


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貨號(hào)GOY-01X0074
結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞:DLD-1 公司正在出售的產(chǎn)品:酵母粉葡萄糖瓊脂(YDC) Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 250g1g Lactulose 室溫保存50T 麻疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存5mL 平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存250mL Anti
結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞:DLD-1 產(chǎn)品詳情

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產(chǎn)品名稱

結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞:DLD-1 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細(xì)胞系

貨號(hào)

GOY-01X0074

商品介紹:

名稱 結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞:DLD-1 

別稱DLD 1; DLD1; CoCL3

種屬人類

年齡(性別)成人

組織來(lái)源結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述DLD-1細(xì)胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細(xì)胞與HCT-15細(xì)胞相似,說(shuō)明這兩者是來(lái)自同一個(gè)人的不同克隆。DLD-1細(xì)胞和HCT-15細(xì)胞的遺傳起源可通過(guò)DNA指紋鑒定證實(shí),但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-),p53抗原表達(dá)呈陽(yáng)性(p53抗原產(chǎn)生了一個(gè)C→T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)DLD-1細(xì)胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性,癌基因c-mycK-rasH-rasN-ras、myb、sisfos的表達(dá)呈陽(yáng)性,癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測(cè)。DLD-1細(xì)胞表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2、CC-3CC-4、CC-5CC-6。1979年提交到ATCCDLD-1細(xì)胞代數(shù)不明且污染了支原體,其后經(jīng)過(guò)12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理,處理之后每周用Hoechst染色和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法檢測(cè)。其后連續(xù)11個(gè)月不加抗生素培養(yǎng),DLD-1細(xì)胞所有的檢測(cè)呈陰性。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~24-48小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

抗原表達(dá)情況Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re

基因表達(dá)情況carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠 TF 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 NET1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 ARFGAP3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 AK1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 THTPA 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 EHD2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 ALDH9A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 MRPL45 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 ENO1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 PNPLA3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞:DLD-1 300U T7 DNA 聚合(未修飾) T7 DNA Polymerase(unmodified) -20℃保存

DTNB  肌萎Dystrobrevin β蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Transaldolase 1  轉(zhuǎn)醛醇抗體 規(guī)格: 0.2ml

UGT1A9  尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移1A9 規(guī)格: 0.2ml

DPY19L2  DPY19L2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mllaminin  層粘連蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-HSF1(Ser303)  磷酸化熱休克因子1抗體 規(guī)格: 0.2mlPAR-1/Thrombin receptor  蛋白激活受體-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-ATRIP (Ser224)  系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體 規(guī)格: 0.1ml

200次 ADP/ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒 ADP/ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit -20℃或-80℃避光保存

PPHLN1  脈周蛋白1抗體(胃抗原蛋白Ga50) 規(guī)格: 0.2ml

GlyR alpha 1/2/3  受體alpha 1/2/3型抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD147/TCSF/Emmprin  細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

1瓶 HPAC細(xì)胞株 HPAC 低溫運(yùn)輸和保存

 


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