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限制壓力對(duì)口鼻吸入暴露染毒實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物影響的研究

來源:北京佰樂良成科技有限公司   2013年07月03日 10:33  

 目的

吸入暴露染毒是化學(xué)品/藥物(如,氣溶膠、粉塵、復(fù)雜混合物等)毒理學(xué)和藥理學(xué)中*的研究方法。典型的吸入暴露染毒研究系統(tǒng),有全身暴露染毒和口鼻式吸入暴露染毒兩種方法,但口鼻式吸入暴露染毒方法中,動(dòng)物固定器對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的負(fù)面影響尚無統(tǒng)一意見。我們通過多用途籠式吸入暴露染毒系統(tǒng)(MIC系統(tǒng),Shibata)進(jìn)行全身暴露染毒與口鼻吸入暴露染毒的對(duì)比實(shí)驗(yàn),進(jìn)行限制壓力對(duì)口鼻吸入暴露染毒實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物影響的研究。
方法
采用多用途籠式吸入暴露染毒系統(tǒng)(MIC系統(tǒng),Shibata公司,詳細(xì)信息參考)(Pic.1)用于動(dòng)物全身暴露染毒和口鼻吸入暴露染毒實(shí)驗(yàn)。

   多用途籠式吸入暴露染毒系統(tǒng),型號(hào)MIC-6
動(dòng)物
雄性大鼠:6周的SD大鼠(Japan SLC, Inc., Shizuoka, Japan),1周到檢疫隔離,動(dòng)物被隨機(jī)分配成3組(每組10只),分別同時(shí)進(jìn)行全身暴露染毒(WBE)和口鼻吸入暴露染毒(NSE)(Pic.2).
 
圖 2:
大鼠被分為3組(2組暴露染毒,1組對(duì)比試驗(yàn))
全身暴露染毒(WBE)(頂部-左側(cè))和口鼻暴露染毒(NSE)(頂部-右側(cè)).
三組染毒籠同時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
 
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
實(shí)驗(yàn)室恒定條件為空氣為23 °C, 55 % 相對(duì)濕度 (RH),通氣6rph,進(jìn)行4周實(shí)驗(yàn),動(dòng)物每天暴露6小時(shí),每周進(jìn)行5天實(shí)驗(yàn),共進(jìn)行4周。每個(gè)NSE動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)時(shí),被放置與透明塑料材質(zhì)動(dòng)物固定器內(nèi)(Shibata公司)。暴露氣體為通過MIC分配過多實(shí)驗(yàn)室空氣。每籠的氣體流量控制在15L/min。 (Fig.1)
觀察和病理檢查
籠內(nèi)的溫度與濕度每次實(shí)驗(yàn)都進(jìn)行實(shí)時(shí)測量,食物消耗量每周統(tǒng)計(jì)一次,動(dòng)物體重前兩周每天測量一次,然后變成2天一次。zui后統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)有動(dòng)物體重,器官重量(胸腺、心臟、肺、肝、腎、腎上腺、睪丸等)。
 
結(jié)果
腔室內(nèi)溫度
溫度恒定在24 °C,相對(duì)濕度保持在66.6±7.3 %RH,在實(shí)驗(yàn)后期每天下降到63.7±7.3 %RH
體重和食物消耗量
從第6天開始,與WBE組相比較,NSE組動(dòng)物體重有變低,從第15天開始,有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。同時(shí)在食物消耗量上,WBE組、NSE組以及控制組沒有顯著變化(表格.1, Fig.2)
器官稱重
NSE組與WBE組相比較,心臟和胸腺重量()統(tǒng)計(jì)上顯著較低,腎臟重量()統(tǒng)計(jì)上顯著較高,睪丸重量和腎上腺重量(相對(duì))統(tǒng)計(jì)上顯著較高。
 
討論
在口鼻吸入暴露染毒中,關(guān)于動(dòng)物固定(或限制)壓力對(duì)動(dòng)物的影響一直備受關(guān)注,其影響情況也一直在討論中,以往的報(bào)告中,長期實(shí)驗(yàn)過程中會(huì)產(chǎn)生約10%的體重抑制,我們的此次實(shí)驗(yàn)結(jié)果也驗(yàn)證了這一情況。同時(shí)我們的實(shí)驗(yàn)還顯示,限制壓力會(huì)對(duì)動(dòng)物胸腺和腎上腺造成顯著影響,這是以往報(bào)道中沒有關(guān)注的。
在OECD的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)中建議使用NSE方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn),但是也指出了WBE方法的必要性,通過使用新型MIC系統(tǒng)對(duì)全身暴露染毒與口鼻吸入暴露染毒的對(duì)比研究的研究,我們發(fā)現(xiàn)其不僅能進(jìn)行WBE的低劑量實(shí)驗(yàn),同時(shí)也可以通過動(dòng)物固定器的使用進(jìn)行NSE的實(shí)驗(yàn),其實(shí)驗(yàn)結(jié)果與傳統(tǒng)口鼻吸入暴露染毒系統(tǒng)表現(xiàn)一致性。同時(shí),它在劑量的使用,對(duì)WBE或NSE以及兩者混合照組設(shè)計(jì)上都具有非常大的靈活性,僅僅通過簡單的修改和組合即可完成傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)方法花費(fèi)巨大時(shí)間和財(cái)力方能達(dá)到的效果。

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