病毒大規(guī)模培養(yǎng)神器

微載體 Cytodex

入門篇

近期疫情逐漸穩(wěn)定，希望新的一年大家心寬體「胖」。 因為微載體的貼壁培養(yǎng)工藝廣泛應用在疫苗的大規(guī)模生產中，接下來，咱們就聊聊病毒大規(guī)模培養(yǎng)的神器-微載體。那么什么是微載體？不同類型微載體的特點？微載體如何操作？以及有哪些成功的應用案例呢？

圖 1 Cytodex 微載體上的 Vero 細胞（染色）

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什么是 Cytodex 微載體？

Cytodex 微載體是專門為培養(yǎng)各種動物細胞的高產量而開發(fā)的，針對不同類型動物細胞，有 Cytodex 和 Cytopore 兩個系列（見圖 1），在這里詳細地給大家介紹下 Cytodex。

Cytodex 微載體（Cytodex 1&3）是基質為葡聚糖的微球，細胞可貼附微球 2D 表面生長，1 g 的 Cytodex1 微載體提供 4400 cm 2 的表面積給細胞貼附。 Cytodex 1幾乎適合所有貼壁細胞。 Cytodex 3表面包被膠原，適合無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。除標準的 Cytodex 產品外， Cytodex 還有經過 Gamma 射線滅菌的產品，無需繁瑣的水化滅菌，可以直接使用。

Cytodex 微載體的特點

①表面特征經過優(yōu)化，適于細胞高效粘附和伸展；

②大小和密度經過優(yōu)化，有利于均勻懸浮，適于寬范圍的細胞優(yōu)良生長和高產；

③基質是生物惰性的，為攪拌培養(yǎng)提供了一個堅硬但是非剛性的底物；

④透明，貼附的細胞用簡單的顯微鏡就能觀察到。

⑤可放大性好。動物細胞懸浮培養(yǎng)已經達到 15,000 L 規(guī)模，貼壁依賴型細胞的微載體培養(yǎng)已經達到 6,000 L 規(guī)模。

表 1 微載體的詳細參數

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微載體有哪些應用？

微載體的應用領域非常廣泛，疫苗、單克隆抗體、天然和重組蛋白，還有前景廣闊的免疫細胞治療領域。

歐洲和世界范圍內的許多國家的絕大多數減毒或滅活疫苗類型的人用和獸用疫苗都在使用微載體進行生產（見表 2）。基于微載體生產的疫苗包括脊髓灰質炎、風疹、狂犬病、流感、日本腦炎（乙型腦炎）、呼吸道合胞病毒（RSV）和口蹄疫（FMD）疫苗等。與其他細胞培養(yǎng)工藝相比，微載體培養(yǎng)工藝可以提高產量，降低成本，并減少污染。Sinskey 等人觀察，使用微載體培養(yǎng)工藝，新德畢斯病毒（Sindbis virus）的單位體積產量可以達到滾瓶培養(yǎng)的 50 多倍。

表 2 微載體在疫苗工業(yè)中的應用狀況

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Cytodex 微載體

可以培養(yǎng)哪些細胞？

實際上，所有培養(yǎng)的動物細胞類別都可培養(yǎng)。Cytodex1 微載體是一般應用的細胞培養(yǎng)表面，凡是能在體外貼壁的細胞將都能夠粘附到 Cytodex1 微載體上。Cytodex3 也為許多在玻璃或者塑料表面粘附或者功能較弱的細胞 類型提供了一個改良的培養(yǎng)表面。

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表 3 按組織分類的在 Cytodex 微載體上培養(yǎng)的細胞類型列表

哺乳動物、禽類、魚和昆蟲細胞已經在 Cytodex 微載體上培養(yǎng), 它們具有廣泛的組織來源，包括 原代細胞， 二倍體細胞株和 傳代/轉化的細胞系。雜交細胞系和腫瘤來源的細胞系也可以，根據相關統(tǒng)計大約有 150 多種細胞可以在 Cytodex 微載體上培養(yǎng)。

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