高效液相色譜儀HPLC時間保留不重現有2種情況，***是保留時間波動和保留時間漂移。
       時間漂移指的是沿著一個方向發生變化，而時間波動則是無規律的波動，吧保留時間漂移和波動分開來對找到問題的原因所在***會有很多幫助。比如：保留時間的漂移是有色譜柱柱子老化引起的。而色譜柱柱子老化又不會引起保留時間的無規律波動，其實，經過研究發現。保留時間漂移的很多原因都是不同機理和性質的色譜柱老化造成的，比如。（固定相流失）（色譜柱污染） 等等


    保留時間漂移的***常見的幾種原因：   


一、液相色譜柱平衡      


如果我們觀察到保留時間漂移，首先應考慮色譜柱是否已用流動相******平衡。通常平衡需要10-20個柱體積的流動相，但如果在流動相中加入少量添加劑（如離子對試劑）則需要相當長的時間來平衡色譜柱。      


流動相污染也可能是原因之一。溶于流動相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上，從而造成保留時間的漂移。應注意：水是很容易污染的流動相成分。  


二、固定相穩定性     


固定相的穩定性都是有限的，即使在推薦的PH范圍內使用，固定相也會慢慢水解。例如硅膠基質在pH4時水解穩定性******。水解速度與流動相類型和配體有關。雙官能團配體和三官能團配體比單官能團配體的鍵合相要穩定；長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩定；烷基鍵合相比氰基鍵合相穩定的多。      


經常清洗色譜柱亦會加速色譜柱固定相的水解。其他硅膠基質鍵合相在水溶液環境中也可以發生水解，如氨基鍵合相等。


三、液相色譜柱污染     


保留時間漂移的另一個常見原因是色譜柱污染。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器，它可以過濾并吸附流動相攜帶的任何物質。


污染源可以是流動相本身，流動相容器，連接管、泵、進樣器和儀器密封墊，以及樣品等。通常通過實驗可判斷污染的來源。


樣品中如果存在色譜柱上保留很強的組分，***可能是使保留時間漂移的潛在根源。這些根源通常是樣品基質。避免色譜柱污染***簡單的方法是防患于未然。通常使用在給定色譜條件下的強溶劑，但并非所有污染物都可以在流動相中溶解。使用保護柱是個非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時采用的辦法。    


四、流動相組成


流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因。如流動相中易揮發組分的揮發及循環使用流動相等。    


五、疏水坍塌      


當小孔徑、端基封口良好的反相填料色譜柱使用接近****的水為流動相時，有時會發生分離突然喪失及被分析物質保留明顯降低或******不保留的現象，這***是疏水坍塌。此現象是由流動相不浸潤固定相表面而致。挽救的辦法實現用含大量有機組分的流動相浸潤固定相，再用高水含量的流動相進行平衡。液相色譜柱長期儲存也會發生此現象。使用內嵌極性基團的反相色譜柱（如賽分色譜柱） 或非端基封口的色譜柱（如賽分色譜柱）也可避免發生坍塌。