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液相色譜柱的如何保存

來源:廣州潤知生物科技有限公司   2025年03月12日 07:33  

1.反向色譜柱實驗后的保養:

使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。

2.長期保存色譜柱:

如,色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下,對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑或硫柳汞)中,并將堵頭堵上,儲存溫度是室溫。


因為,色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,會出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰的現象,一般來說是柱效的下降。

1.反向柱的再生:

依次采用20~30倍的色譜柱體積的甲醇:水=10:90(V/V),乙腈,異丙醇作為流動相沖洗色譜柱,完成后再以相反順序沖洗色譜柱。

2.正相柱的再生:

依次以20~30倍的色譜柱體積正己烷、異丙醇(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)、二氯甲烷、甲醇作為流動相沖洗色譜柱,然后再以相反的順序沖洗色譜柱。要注意以上溶劑必須嚴格脫水。

3.離子交換柱的再生:

長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。

特別說明:

再生過程必須隨時關注柱壓變化,柱壓過高易導致硅膠變形與開裂及鍵合相極性端連接順序紊亂,同時要保證再生時間足夠。再生時選擇不具備在線脫氣的獨立泵送系統色譜儀器進行,以防正相溶劑損壞脫氣機密封膜或分子篩及比例閥等儀器精密部件。

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