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如何提高色譜柱柱效

來源:廣州潤知生物科技有限公司   2025年03月12日 07:29  

色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標,混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關。那么,如何有效地提高色譜柱的柱效呢?

在一定的色譜操作條件下,色譜柱的柱效可用理論塔板數或理論塔板高度來衡量。一般說來塔板數愈多,或塔板高度愈小,色譜柱的分離效能愈好。

如何提高HPLC柱效?

要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。 以下介紹了幾種國際上流行的測量和計算柱效值的方法。

提高液相色譜柱柱效的方法

1、要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。

(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。

(2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

(3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。


(4)選用低粘度的移動相,以利于快速傳質,但卻不利于多組份分析。

(5)適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。

(6)盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。

從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到好的工作條件。

2、對柱效值進行跟蹤測算應注意的問題

我們也應記住柱效值并不足以預測在所有條件下的柱性能,對大多數色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。

不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數影響柱效的測定。這些參數包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數所用的溶質,溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。

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