1.溶解氧

由于冬季測試溫度設定在 20°C，溶解氧過飽和，夏季采集的樣品在 20°C 時可能會出現欠飽和。這些樣品應在 BOD5 測定之前進行攪拌和充氣，以將溶解氧調節到 20°C 飽和點附近。

2、pH

待測水樣的pH值應調至6.7~7.5（點為pH7.2）。 BOD5讀數下降可能是因為被測樣品的pH值超過了這個范圍，含有大量的酸或堿。樣品中，BOD5 讀數可能低于實際含量。

酸性或堿性水樣應使用適當濃度的 NaOH 或 H2SO4 中和。

如果工業廢水含有酸性或鹽的氧化物，或需要高度稀釋，對于標準的五天 BOD5 測定，可以使用 pH 7.2 的磷酸鹽緩沖液作為稀釋劑。

3.溫度

實驗期間將攪拌器置于 20°C ± 1°C 的培養箱中。 BOD的測定也可以超過這個溫度范圍。例如，在 35°C 或 37°C 時，測量 BOD 所需的時間可分別縮短至 2.5 天或 34 小時，測量結果與 五日20°C相似。升高溫度得到的BOD值與第5天在20℃下測得的結果有很好的相關性。

如果采樣過程中樣品溫度超過 20°C，或樣品溫度低于 20°C，可將樣品置于恒溫箱中恒溫。樣品需要在樣品測量之前進行處理。

4、BOD5的稀釋

儀器的測量范圍為0～1000mg/L。如果測試樣品的 BOD5 估算值高于 1000mg/L，可用稀釋水稀釋樣品。加入的稀釋水也應保持在20°C，并應使用曝氣使氧氣飽和。如果需要測試幾個相同的樣品，應將足夠量的原始水樣稀釋，并從稀釋后的樣品中取出與測量范圍相對應的體積。 .例如，原水樣稀釋兩次時，稀釋倍數為2；原水樣按1:10稀釋時，稀釋倍數為10。

5. BOD5 的接種

什么是接種

BOD5實驗要求水樣中含有用于生物氧化的有機物和含有適量氧化性有機物的好氧菌，吞食促進好氧菌生長的有機物和其他微生物。如果水樣中沒有或幾乎沒有此類微生物，則必須將一定比例的此類微生物添加到水樣中。這個過程應該稱為接種。

與生活污水不同，工業廢水可能沒有足夠的細菌來生化分解樣品中所含的有機物。如果待測樣品為此類廢水，應加入接種液。

6、BOD5的接種方法

接種溶液的制備

用于接種的溶液是未經處理的新鮮生活污水的上清液，在 20°C 下放置 24-36 小時。

在下次實驗中，若要使用以前測定過的水樣作為接種液應經濾紙過濾，這種濾液在冷藏（約20℃）、避光的條件下保存，一般在二個月內可能是有效的。

將待測樣品放入培養瓶中，用吸管向樣品中加入2～5滴接種物（視樣品量而定）。按照步驟測量BOD5，五天后得到的讀數可作為測試樣品的真實BOD5值。

注意：使用上述方法接種時。沒有必要校正接種的 BOD5 讀數。由于加入的接種量相對于水樣量來說太少，不會影響BOD5讀數。如果上述方法不能誘導水樣中有機物的生物降解，可以增加接種量。如果 BOD5 分析儀的讀數受到接種物添加的影響，可以同時測試接種物和樣品，進行平行樣品測定。

接種量通常為1%、5%和10%。