怎樣選擇高效液相色譜柱

現(xiàn)代高效液相色譜柱中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜柱填料的選擇中。但是色譜柱填料的選責(zé)范圍很寬，要做合適的選擇，必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。今天小編就講講兩種常規(guī)的材料的色譜質(zhì)填料。

一、硅膠基質(zhì)填料    

1、正相色譜

正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán) (ZH、APS)和氰基團(tuán)（CN、CPS）的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基（SiOH）或其他團(tuán)的極性教強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強(qiáng)落的組份被沖洗出高效液相色譜柱。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如：正乙烷、氯、二氯甲烷等。

2、反相色譜

反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對(duì)教弱的官能團(tuán)的鍵合相。

反相色譜所使用的流動(dòng)相極性教強(qiáng)，通常為水，緩沖液與甲醇，已腈等混合物。

樣品流出色譜柱的順序是極性教強(qiáng)組合被沖出，而極性弱的組份會(huì)在高效液相色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反相填料有C18（ODS）、 C8（MOS）、C4（B）C₆H₅等。

二、聚合物填料

聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等，其主要優(yōu)點(diǎn)是在PG值為1-14均可使用。相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更強(qiáng)的淑水性；大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料，高效液相色譜柱柱效教低。