日韩毛片在线视频-日韩毛片在线影视-日韩美aaa特级毛片-日韩美a一级毛片-久久夜夜操妹子-久久夜夜肉肉热热日日

產(chǎn)品推薦:水表|流量計|壓力變送器|熱電偶|液位計|冷熱沖擊試驗箱|水質分析|光譜儀|試驗機|試驗箱


儀表網(wǎng)>技術中心>故障維護>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

滬鼎生物教您如何細胞活化與復蘇

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2021年05月18日 11:43  

很多小伙伴做實驗會用到細胞,那么我們在收到細胞時該如何處理呢?
首先收到細胞株包裹時,請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請立即通知。細胞株請盡快開始培養(yǎng),或立即冷凍保存。

細胞復蘇的原則-快速融化:
必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶,對細胞造成損害。

一. 實驗前準備:

1.將水浴鍋預熱至37℃

2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。

3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。

二.取出凍存管:

1.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。

2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。

三.迅速解凍:

1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。

2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。

四.平衡離心:

用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min

五.制備細胞懸液:

1.吸棄上清液。

2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液。

六.細胞計數(shù):

細胞濃度以5×105/ml為宜。

七、冷凍細胞解凍程序

1.依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單認定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它認定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時, 務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。

2.FBS(fetal bovine serum,胚牛血清),CS(calf serum, 小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單認定之血清種類培養(yǎng)之。

3.將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70% 酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C 水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70% ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。

4.依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75 flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

5.對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。唯對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者。

免責聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:儀表網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-儀表網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:儀表網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
  • 本網(wǎng)轉載并注明自其它來源(非儀表網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點或和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
聯(lián)系我們

客服熱線: 15267989561

加盟熱線: 15267989561

媒體合作: 0571-87759945

投訴熱線: 0571-87759942

關注我們
  • 下載儀表站APP

  • Ybzhan手機版

  • Ybzhan公眾號

  • Ybzhan小程序

企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87759942
主站蜘蛛池模板: 亚洲夜夜操 | 黄网站色视频免费观看w | 亚洲精品第一综合99久久 | 操皮视频| 久久国产高清一区二区三区 | 色视频网站免费 | 免费在线观看成年人视频 | 一级裸片| 伊人a.v在线 | 午夜伦理网 | 男男1v1高h猛烈做哭bl强制 | 国产黄色片在线免费观看 | 国产精品资源在线 | 国产国产成人人免费影院 | 国产成人福利在线 | 免费黄在线 | www.成年人| 曰本a | 激情五月综合综合久久69 | 78m成年视频免费观看 | 国产一级做a爱免费观看 | 久久看免费| 国产在线观看一区二区三区 | 国产成人精品男人的天堂538 | 国产成人精品免费视频大全麻豆 | 在线色视频网站 | 在线观看亚洲专区 | 福利片在线看 | 一区二区三区在线视频播放 | 大陆60老妇xxxxhd | a一级爱做片免费 | 一级片中文字幕 | 日韩在线视频网 | 天天摸夜夜摸爽爽狠狠婷婷97 | 91短视频官网| 亚洲欧美日本综合一区二区三区 | 最近中文字幕完整在线看一 | 人人搞人人搞 | 精品中文字幕一区二区三区四区 | 性欧美激情在线观看 | 欧美高清另类video |