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甘油三酯(TG)測(cè)試盒,GPO-PAP酶法,操作步驟詳解

來源:上海百蕊生物科技有限公司   2015年07月14日 14:30  

上海百蕊生物代理銷售甘油三酯(TG)測(cè)試盒,GPO-PAP 酶法檢測(cè),現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎。操作步驟如下:

1、樣本處理:

①、血清(漿)直接測(cè)定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。

②、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,2500 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,取上清測(cè)定。

[]:一般建議細(xì)胞密度在 100 萬個(gè)/ml 以上。

③、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1的比例,加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì),冰 水浴條件下機(jī)械勻漿,2500 轉(zhuǎn)/,離心 10 分鐘,取上清液待測(cè)。

[]:1、如組織樣本不存在高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進(jìn)行提取。 2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取

④、細(xì)胞樣本:

A、細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;用 等滲緩沖液(推薦 0.1mol/L pH77.4 磷酸鹽緩沖液)清洗 12 次,同樣 1000 轉(zhuǎn)/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細(xì)胞沉淀;

B、細(xì)胞破碎:加入 0.20.3ml 的勻漿介質(zhì)(推薦 0.1mol/L pH77.4 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水) 進(jìn)行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,35 /,間隔 30 秒,重復(fù) 3)或手動(dòng)勻漿, 制備好的勻漿液不離心待測(cè)。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-10012%,裂解 3040 分鐘), 裂解好的液體不離心直接測(cè)定。

[]:一般建議細(xì)胞密度在 100 萬個(gè)/ml 以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎*


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