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A-498(人腎癌細(xì)胞)運輸

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更新時間:2017-08-11 15:50:27瀏覽次數(shù):177次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
A-498(人腎癌細(xì)胞)運輸,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。

產(chǎn)品名稱:A-498(人腎癌細(xì)胞)運輸
英文名稱:A-498 (human renal carcinoma cells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0811
A-498(人腎癌細(xì)胞)運輸的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
A-498(人腎癌細(xì)胞)運輸培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse plaet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit  小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Human ovarian cancer marker-CA125 ELISA Kit  人卵巢癌標(biāo)志物CA125    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
AFP(Human Alpha-fetoprotein) ELISA Kit  人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit  小鼠游離脂肪酸    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ALP-B ELISA Kit  大鼠骨特異性堿性磷酸酶B    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TSP-1(Mouse thrombospondin 1) ELISA Kit  小鼠血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
CEA/CD66(Human carcinoembryonic antign) ELISA Kit  人癌胚抗原    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TFR/CD71 ELISA Kit  大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TIMP-4(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 4) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ON(Mouse osteonectin) ELISA Kit  小鼠骨粘連蛋白    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Cys-C ELISA Kit  大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
FA(Mouse Folic acid) ELISA Kit  小鼠*    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TIMP-3(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
F VIII Ag ELISA Kit  大鼠第八因子相關(guān)抗原    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
TIMP-2(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
M2-PK ELISA Kit  大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
A-498(人腎癌細(xì)胞)運輸histon-H2b(Mouse histon-H2b) ELISA Kit  小鼠組蛋白H2b    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
AChRab ELISA Kit  大鼠乙酰*受體抗體    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
OSM(Human Oncostatin-M) ELISA KIT  人抑瘤素M    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
VCAM-1/CD106(Mouse Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA Kit  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GR(Mouse glucocorticoid receptor) ELISA Kit  小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GABA ELISA Kit  大鼠γ氨基丁酸    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SP-D(Human Pulmonary surfatcant-associated protein D) ELISA Kit  人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T

 

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