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SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片

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更新時(shí)間:2017-08-11 15:19:42瀏覽次數(shù):117次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱:SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片
英文名稱:SK-Hep-1(human hepatomacells)
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0770
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

*    供應(yīng)規(guī)格:     96T
8-OHdG(Human hydroxylysine) ELISA Kit  人8羥基脫氧鳥苷    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit  人羥賴氨酸    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GAP(Human GTPase activating protein) ELISA Kit  人GTP酶活化蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit  人載脂蛋白H    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit  人糖磷脂酰肌醇    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PWM(Human pokeweed mitogen) ELISA Kit  人美洲商陸素    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
LPS(Human Lipopolysaccharides) ELISA Kit  人脂多糖/內(nèi)毒素    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Human preptin ELISA Kit  人preptin    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit  人過氧化物酶體增殖物激活受體α    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit  人載脂蛋白E    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit  人成骨生長肽    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit  人破骨細(xì)胞分化因子    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit  人羥基膠原吡啶交聯(lián)    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人脫氧膠原吡啶交聯(lián)    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit  人膠原吡啶交聯(lián)    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit  人葡萄球菌蛋白A    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit  人刀豆素A    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit  人游離原卟啉    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit  人脂多糖結(jié)合蛋白    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GSH-Px(Human Glutathione peroxidase) ELISA Kit  人*過氧化酶    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
GSH(Human glutathione) ELISA Kit  人*    進(jìn)口/原裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
SK-Hep-1(人肝癌細(xì)胞)圖片17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit  人17-酮類固醇    進(jìn)口/分裝    供應(yīng)規(guī)格:     96T
17-OHCS(Human 17-Hydroxycorticosteroids) ELISA Kit  人17羥皮質(zhì)類固醇    現(xiàn)貨供應(yīng)    供應(yīng)規(guī)格:     96T
cath-K(Human Cathepsin K) ELISA Kit  人組織蛋白酶K    *    供應(yīng)規(guī)格:     96T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) ELISA Kit  人骨形成蛋白    

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