為你出游盡我所能ELISA試盒劑
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總結和展望
本文以ELISA競爭法方法學開發和初步方法學驗證的案例概論了功能學實驗和定量實驗的通用原則，包含以下幾個步驟：

1. 鑒于生物學方法的雙重間接性，明確檢測的目標分子，設置多個陽性對照組和陰性對照組，理清信號值和檢測目標分子的線性聯系；

2. 建立Test system，通過配體受體的結合實驗，尋找合適的配體受體相對濃度以得到樣品對Test system的敏感性；

3. 加入梯度稀釋的樣品進入Test system，繪制樣品相對于Test system的劑量全曲線；

4. 以實驗目的為導向，分別對親和力大小比較為目的和大分子定量為目的進行差異的濃度點選擇，并通過合規的方法學評價程序對方法的質量進行初步的評價。 

ELISA直接法和ELISA競爭法有相同的方法學質量評價程序和標準，即親和力大小比較的方法學質量評價程序和標準USP1032,1033,1034；定量分析的方法學質量評價程序和標準2015版中國藥典第三部9012 生物樣品定量分析方法驗證指導原則或者美國FDAxin版本的Guidance for Industry Bioanalytical Method Validation。ELISA競爭法在相同的實驗條件下對于對照品濃度點的微調可以完成親和力大小比較和大分子定量兩方面應用，這個有別于筆者之前的文章ELISA技術應用概覽和方法學開發初析對于ELISA直接法兩方面不同應用不同的實驗條件，但是兩類方法的四種應用均能夠通過驗證符合標準要求，只能說實踐出真知，不管白貓黑貓，能抓住老鼠的就是好貓了。

在體外所有的體外功能學實驗中，樣品引起檢測體系的變化，并以信號的形式展示出來，這個應該是體外生物學實驗方法通用的原則，有結合才會有功能，功能是對藥物引起的變化（響應標志物）的準確定量。理解ELISA實驗關于結合和定量的應用以及方法質量評估標準對于所有的功能學實驗的開發和評價都有著十分重要的借鑒意義，ELISA里面有乾坤。