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PAGE連續凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
PAGE連續凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
PAGE連續凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽)
人腎系膜細胞*培養基 100mL
TGFBR2 Others Rat 大鼠 TGFBR2 人細胞裂解液 (陽性對照)
BALB/3T3 clone A31細胞,小鼠胚胎成纖維細胞 L1210(白血病細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0901
人羊膜細胞;WISH
SiHa(人子宮頸鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106
DUSP3 Others Human 人 DUSP3 / VHR 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
肝動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
小鼠海馬神經膠質細胞(EGFP標記) 小鼠骨骼成纖維細胞,BLO-11細胞 RM-1(前列腺癌細胞)
人癌細胞;SK-BR-3
AGRP Others Human 人 AgRP / AGRP 人細胞裂解液 (陽性對照)
IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Interferon Gamma 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腎系膜細胞HRMC
牛腎細胞;MDBK
NCI-H23細胞,人非小細胞肺癌細胞 小鼠成纖維細胞,3T3NIH細胞 CM-R087大鼠軟骨細胞*培養基100mL
RKO(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 17005042 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid(10724-011和37000015) 500ml
大鼠*IX(FIX)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人*肽酶2甘露聚糖結合凝集素(MASP2)免疫試劑盒 Human mannan-binding lectin serine peptidase 2,MASP2 ELISA kit
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISA試劑盒大鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanLuteinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規格:96T/48T
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human pancreatic kallikrein (PK) ELISA Kit 人*(PK)ELISA試劑盒
HumanInterferonα,IFN-αELISAKit 人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanGuanineExchangeFactor,GEFELISA試劑盒人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織非蛋白/游離巰基含量熒光定量檢測試劑盒20次
HumanmeaslesvirusIgM,MVIgMELISAKit人麻疹病毒IgM(MVIgM)ELISA試劑盒規格:96T/48T
PAGE連續凝膠電泳緩沖液(2×,PH8.9)100ml使用說明書大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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