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活性氮檢測試劑盒RNS200T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
活性氮檢測試劑盒RNS200T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活性氮檢測試劑盒RNS200T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
皮下脂肪細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
COL4A3 Others Rat 大鼠 COL4A3 人細胞裂解液 (陽性對照)
Hut-102細胞,人T淋巴瘤細胞系 Walker氏癌肉瘤256瘤株,W256細胞 人小氣道上皮細胞裂解物HSAEpiCL
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞;DH82
Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0070CRFK(貓腎細胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755
人肺泡上皮細胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg
FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照)
人臍靜脈內皮細胞*培養基 100mL
HSC-T6細胞,鼠肝星形細胞 SW620(結腸癌細胞) 人前列腺癌低轉移細胞株;PC-3M-2B4
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白
SW620(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20
SD大鼠骨髓間質干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
HME4細胞,人黑色素瘤細胞 青春雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0905
UACC-812(人導管瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
HuH-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928
大鼠糖皮質類固醇受體(GR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人唾液過氧化物酶(SP)免疫試劑盒 Human Saliva Peroxidase,SP ELISA Kit
蔗糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanInterleukin3,IL-3ELISA試劑盒人白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit人髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human thymidylate synthase (TS) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶(TS)ELISA試劑盒
Humananti-Sa-antibodyELISAKit 人抗Sa抗體(anti-Sa-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanEndotheliallipase,ELELISA試劑盒人內皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織PKCβ2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Humanpaxillin,PaxELISAKit人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒規格:96T/48T
活性氮檢測試劑盒RNS200T使用說明書人丙酸轉酶/谷丙轉酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人丙酸基轉移酶(ALT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人表皮細胞活化肽因子(CAPF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人表皮生長因子受體2(Her2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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