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α-*(α-AMS)檢測試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
α-*(α-AMS)檢測試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
心肌成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
TNFSF12 Others Rat 大鼠 TNFSF12 人細胞裂解液 (陽性對照)
Mo7e細胞,人巨細胞白血病細胞株 小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞 角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+
BT-474(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠表皮角化細胞*培養基100mL 人Burkkit淋巴瘤細胞;Daudi
骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照)
Rat Astrocytes 大鼠星形膠質細胞
中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]
DU 145, 人前列腺癌細胞
人成骨肉瘤細胞;MG-63 大鼠小腸隱窩上皮細胞*培養基 100mL
大鼠海馬趾神經細胞(RHh)(1×106)
人胚腎二倍體細胞;HEK-2
CM-H016人呼吸道上皮細胞*培養基100mL
615小鼠癌瘤株;Ca761 小鼠子宮成纖維細胞*培養基 100mL
MN-h, 小鼠海馬神經元 Mouse
EPHA2 Others Mouse 小鼠 EPHA2 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人微管多特異性有機陰離子轉運蛋白1(ABCC2)免疫試劑盒 Human Canalicular multispecific organic anion transporter 1,ABCC2 ELISA kit
ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 紫外分光光度法 25管/24樣
RatregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RANTESELISA試劑盒大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanInterleukin17,IL-17ELISA試劑盒人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISAKit人粘膜相關上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒規格:96T/48T
兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
People lentils binding type AFP / AFP Variant 3 (AFP-L3) ELISA kit E 人小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISA試劑盒E
Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISAKit *重鏈(IgH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISA試劑盒人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織PAK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanperoxisomeproliferativeactivatedreceptorgamacoactivator1alpha,PPARGC1ELISAKit人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA試劑盒規格:96T/48T
α-*(α-AMS)檢測試劑盒100T免費代測人促上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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