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CGM1細(xì)胞;人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)方法

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CGM1細(xì)胞;人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法如下:
1、從手術(shù)室無(wú)菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍體積的Hanks液中,此時(shí)腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反復(fù)二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分。
4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,通過(guò)紗網(wǎng)成紗布過(guò)濾,計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度。
5、接入培養(yǎng)瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。
CGM1細(xì)胞;人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備和安裝過(guò)濾器:清洗好過(guò)濾器,干燥,放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜,用布包裝好,15磅20 min進(jìn)行高壓滅菌處理。 在超凈臺(tái)內(nèi)打開(kāi)過(guò)濾器架好,膠管一端接入濾泵再插入待除菌的液體中,出口端膠管深入到已消毒好的瓶子中。用泵過(guò)濾,過(guò)濾后要檢查濾膜是否完好無(wú)損。
CGM1細(xì)胞;人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞在適宜培養(yǎng)基中可以增殖,從而可以測(cè)定腫細(xì)胞克隆形成率。造血系統(tǒng)軟瓊脂集落形成試驗(yàn)方法相同,主要用于有關(guān)細(xì)胞分化的研究,但使用培養(yǎng)基不同。
我們細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB、RIKEN等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,CGM1細(xì)胞;人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),90%進(jìn)口來(lái)源,保證四代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
Anti-HOXc8      規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產(chǎn)品名稱(chēng):    同源盒基因的一種
Anti-H-ras      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱(chēng):    原癌基因H-ras抗體
Anti-HSL      規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產(chǎn)品名稱(chēng):    荷爾蒙敏感脂肪酸抗體
Anti-HSP-27      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱(chēng):    熱休克蛋白-27抗體
Anti-HSP-60      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱(chēng):    熱休克蛋白-60抗體
Anti-HSP-70       規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產(chǎn)品名稱(chēng):    熱休克蛋白-70抗體
CGM1細(xì)胞;人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞

 

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