液相色譜流動相是液體，對組分有親合力，并參與固定相對組分的競爭，正確選擇流動相溶劑直接影響樣品組分的分離。
一、溶劑對于待測樣品必須具有合適的極性和良好的選擇性。
二、溶劑與檢測器匹配：
對于紫外吸收檢測器，不能用對紫外光有吸收的溶劑。
對于示差折光檢測器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相，以達到高靈敏度。
三、高純度：
由于液相色譜靈敏度高，對流動相溶劑的純度要求高。不純的溶劑會引起基線不穩或產生假峰。
四、化學穩定性好。
五、粘度適中：
若溶劑粘度高，會增高壓力，不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、甲醇和乙腈等。
粘度過低的溶劑不宜采用，如戊烷等，它們容易在色譜柱和檢測器內形成氣泡，影響分離。
液相色譜儀的梯度洗脫是指在同一個色譜分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比。梯度洗脫又稱梯度淋洗或程序洗脫。
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