我公司提供的輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格方法分類：紫外分光光度法、可見分光光度法、微量法、酶法、高效液相色譜法本方法提供代測服務!咨詢！
產品名稱：?輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格
規格：100T 測試方法：高效液相色譜法

測定意義

輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，NADP+和NADPH分別是磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應中主要的氫受體和供體。NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。較高的NADP(H)含量和NADPH/NADP+比值說明細胞處于較強的磷酸戊糖代謝途徑，生物合成能力旺盛，抗氧能力較強。NADPH/NADP+比值升高也可抑磷酸戊糖途徑的進行。

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格測定原理

NADP+和NADPH在254 nm下有吸收峰，利用高效液相色譜法在相應波長下測定其含量。

需自備的儀器和試劑

高效液相色譜儀、低速離心機、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器（水系，50個，0.22μm）、濾膜（水系和有機系各2個，0.45μm）、C18柱（4.6 ×150 mm）、可調式移液器、樣品瓶（50個，2mL）、乙腈（120 mL）、甲醇（色譜級，300 mL）、蒸餾水
注：若用自動進樣器，需要樣品瓶，測定時將不少于1mL的樣品或標準品加入樣品瓶中。無自動進樣器，需手動進樣時，用進樣針將不少于20ul的樣品或標準品打入進樣閥。

輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格成及試劑配制
1：預包被板: 96T/48T
2：酶標記抗體: (30倍濃縮)HRPIgG,親合純化 0.4mL x 1
3：標準品: -6 0.5mL x 2
4：EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5：標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6：顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7：終止液: 1N 12mL x 1
8：濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與Z后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。 7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。
100684    *    100684-200401    HPLC法含量測定        100mg
100685    *    100685-200401    UV法含量測定        100mg
100686    *    100686-200401    含量測定        100mg
100687    *    100687-200401    含量測定        100mg
100688    *    100688-200401    HPLC法含量測定        50mg
100689    *    100689-200401    含量測定        100mg
100690    托芬那酸    100690-200401    UV含量測定        100mg
100691    鹽酸阿比朵爾    100691-200401    含量測定        100mg
100692    *    100692-200501    含量測定        100mg
100693    *    100693-200501    含量測定        100mg
100694    單*     100694-200401    HPLC法含量測定        50mg
100695    2-單*    100695-200401    供檢查用        20mg
100696    *酯    100696-200401    含量測定        200mg
100697    馬來酸*    100697-200401    含量測定        100mg
100698    *    100698-200501    HPLC法含量測定        100mg

*過氧化物酶/GPX/GSH-Px，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，生物技術級，100u/mg1毫克 9013-66-5保存：-20℃
，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，5毫克 
中文名稱： *過氧化物酶 
英文名稱： GSH-Px 
其他英文名稱： GPX；Glutathione Peroxidase from bovine erythrocytes 
產品規格： 生物技術級，100u/mg 
包裝： 1毫克/5毫克 
號：9013-66-5 
分子量：～80000
級別：BioChemika
活力：～100 units/mg 
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100T規格活力定義：1 U corresponds to the amount of enzyme which catalyzes the oxidation by H2O2 of 1 μmol reduced glutathione to oxidized glutathione per minute at pH 7.0 and 25℃
性狀：粉末
用途：生化研究。
保存：-20℃